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动物细胞工程
(30分钟100分)
1.(11分)(2024·武汉模拟)如图为动物细胞培育的基本过程示意图。
请回答下列问题:
(1)容器A中放置的一般是幼龄动物的器官或组织,缘由是其细胞_____________,易于培育。培育时先要剪碎,然后用_____________分散细胞,制成B瓶中的细胞悬液。将细胞悬液转入C瓶中进行的初次培育称为_______。?
(2)细胞正常培育了一段时间后,发觉细胞绝大部分死亡,只有极少数细胞存活,这是因为存活的细胞发生了_______,可无限增殖。目前运用的或冷冻保存的正常细胞通常为_______代以内的细胞,以保持细胞正常的_______核型。?
(3)动物细胞体外培育时,通常要在培育基中补充肯定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培育影响的试验结果。据图可知,培育_______细胞肯定要添加血清。?
【解析】(1)动物细胞培育的过程:取动物组织块(或动物胚胎或幼龄动物的器官、组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培育瓶中进行原代培育→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,然后分瓶传代培育。(2)培育10代以内的细胞可以保持正常的二倍体核型,50代以后的细胞发生基因突变,获得了不死性。(3)据图可知,培育癌细胞时有无血清影响不大,而培育正常细胞时,有血清时的细胞数远大于无血清时的细胞数,故培育正常细胞必须要添加血清。
答案:(1)分裂实力强胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)原代培育
(2)基因突变10二倍体
(3)正常
2.(9分)(2024·贵阳模拟)艾滋病病毒(HIV)外壳的包膜上有多种蛋白质,其中包膜糖蛋白基因编码、加工成gpl20蛋白具有较强的抗原性。制备抗HIVgpl20的单克隆抗体,为艾滋病的治疗带来希望。请回答下列问题:
(1)利用动物细胞工程制备抗HIVgpl20的单克隆抗体,涉及动物细胞融合技术。融合得到的细胞须要用特定的选择性培育基筛选,只有融合的_________才能生长,这种细胞的特点是______________________________。?
(2)将筛选出来的细胞进行体外培育,须要在培育液中通入肯定浓度的O2和CO2,CO2的主要作用是__________________。?
(3)科研人员设想用基因工程制备能表达抗HIVgpl20抗体的重组细胞,将包膜糖蛋白基因的表达载体导入动物细胞中,为了检测包膜糖蛋白基因是否胜利表达,可用相应的___________与提取的gpl20蛋白杂交。?
(4)以gpl20蛋白作为疫苗预防接种比较平安,其缘由是gpl20蛋白自身没有感染力,但保留有_________________,gpl20蛋白进入人体将引起人体特异性免疫中的________免疫。?
(5)采纳转基因重组细胞进行体细胞的克隆,理论上可获得无限个转基因体细胞,这是因为________________________。?
【解析】(1)制备抗HIVgpl20单克隆抗体时,融合得到的细胞须要用特定的选择培育基筛选,只有融合的杂种细胞才能生长,这种细胞的特点是既能大量繁殖,又能产生抗HIVgpl20抗体。(2)将筛选出来的细胞进行体外培育,采纳的是动物细胞培育技术,须要在培育液中通入肯定浓度的O2和CO2,其中CO2的主要作用是维持培育液的pH。(3)包膜糖蛋白基因属于目的基因,检测目的基因是否胜利表达相应的蛋白质,可采纳抗原—抗体杂交技术,即用相应的抗体与提取的gpl20蛋白(抗原)杂交。(4)gpl20蛋白自身没有感染力,但保留有刺激机体发挥免疫功能的实力,因此以gpl20蛋白作为疫苗预防接种比较平安。gpl20蛋白作为抗原进入人体,将引起人体特异性免疫中的体液免疫。(5)采纳转基因重组细胞进行体细胞的克隆,理论上可获得无限个转基因体细胞,这是因为整合含有目的基因的体细胞可进行传代培育。
答案:(1)杂种细胞既能大量繁殖,又能产生抗HIVgpl20抗体
(2)维持培育液的pH
(3)抗体
(4)刺激机体发挥免疫功能的实力体液
(5)整合含有目的基因的体细胞可进行传代培育
3.(10分)(2024·凯里模拟)肿瘤的病理学检查是确定肿瘤的诊断、组织来源以及性质的重要依据。回答下列问题:
(1)免疫组化是最近10多年来快速发展起来的一门新兴的病理学检测技术。在国外已被广泛运用于肿瘤探讨和诊断,其原理是利用抗原与抗体的特异性结合反应来检测组织中的__________________。?
(2)免疫组化试验用到的抗体主要是单克隆抗体,制备单克隆抗体用到的动物细胞工程技术手段有_________________和____________________。?
(3)单克隆抗体
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