细胞分化的分子机制转录、转录前和转录后.pptVIP

(三)转录调控的“开关基因”(switchgene)Switchgene:发育中可以决定细胞向两种不同命运分化的基因（主基因的表达决定）果蝇腹中线外胚层细胞具有分化成为上皮细胞或神经母细胞的双重潜能；notch转录缺乏时，腹中线所有细胞都分化成神经母细胞，胚胎不能正常发育；notch控制分化成皮肤细胞和神经母细胞myod1转录子是肌细胞分化的主要开关基因，也是肌母细胞决定子。将其通过病毒载体转染其它细胞（如色素细胞、神经细胞、脂肪细胞、肝细胞等），可使它们转分化为肌细胞。真核生物基因的结构：外显子与内含子真核生物的基因主要由两种DNA序列组成：一种是蛋白质编码序列称为外显子(exon)，另一种是非蛋白质编码序列称为内含子(intron)。编码一个蛋白质的序列常以外显子和内含子镶嵌排列的方式存在。不同基因具有内含子的数目和内含子的长度差异很大。真核生物的基因还包括5’和3’末端长度不等的特异性序列，这些序列虽然不编码氨基酸，但在基因表达的过程中起重要作用。三、差异基因转录的调控机制人β-珠蛋白基因的10个区域①启动子区：启动子区位于转录起始点上游-95--26bp，由两个上游启动子成分和TATA盒组成。这个区域负责与RNA聚合酶结合，同时与以后的转录起始有关。②ACATTG序列：该序列位于RNA的5’末端，又称为帽子序列，是转录的起始点，在转录后帽子序列将被修饰，这段序列在不同的基因中有差异。③翻译起始密码ATG:该密码子位于转录起始点后50bp处，在转录的起始点和翻译起始点间的这段序列称为前导序列，其长度在不同基因中差异很大。由前导序列决定翻译的速率。①①①②③人β-珠蛋白基因的10个区域第一外显子：长90bp，编码人β-珠蛋白的1-30个氨基酸。第一内含子：长130bp，是人β-珠蛋白的非编码序列，但对于RNA加工成为mRNA并转运到细胞核外具有重要作用。第二外显子：长222bp，编码人β-珠蛋白的31-104个氨基酸。1234人β-珠蛋白基因的10个区域第二内含子：长850bp，也是人β-珠蛋白的非编码序列。第三外显子：长126bp，编码人β-珠蛋白的105-146个氨基酸。翻译终止密码子TAA人β-珠蛋白基因的10个区域3’末端非翻译区：这段序列虽然转录但是并不参与蛋白质的翻译。该区域包括AATAAAA序列，此序列为转录的RNA产物在3’末端增加200-300多聚核苷酸[poly（A）]尾所必需。poly（A）尾插入进RNA的位置是在AAUAA下游约20bp处，但是转录继续进行超过AATAAAA序列的位置，终止在大约1000bp处。在3’末端非翻译区序列中，从AATAAAA位点后600-900bp具有增强子功能，对于成体红细胞前体β-珠蛋白基因适时的和组织特异性的表达是必需的。1真核生物基因的转录起始和表达的调控依赖于两类调控元件的相互作用，一类是顺式调节子，另一类是反式调节蛋白。2启动子和增强子都是顺式调节子，它们能与特定功能基因连锁，作用于邻近基因的表达。3反式调节蛋白是可溶性的分子，包括具有调控作用的蛋白因子和RNA，它们可作用于邻近基因或其他基因。（二）启动子和增强子启动子：是位于转录起始位点上游的特殊DNA序列。能被RNA聚合酶Ⅱ识别和结合，对于决定基因转录起始和保证DNA精确，有效地转录具有极其重要作用。转录量相对较大的基因，启动子都具有相似的结构。一个保守性较高且富含TA的序列，又称为TATA框，位于转录起始位点上游大约30bp处。另外在TATA框的上游还有一个或多个上游启动子元件，如：CCAAT(CAAT框）、GGGCGGG(GC序列）、GGGAGAGGG和ATGCAAAT序列。TATA框的主要作用：是使转录精确地从起始位点开始，其他的上游启动子元件：主要调控转录起始频率和维持基因转录，特别是CAAT框的作用相对较大。0103021.启动子的结构与功能基因转录还需要RNA聚合酶与启动子的相互作用。在转录开始之前，首先要形成RNA聚合酶和启动子的转录起始复合物。绝大多数真核生物的细胞有3种类型RNA聚合酶，即RNA聚合酶Ⅰ、RNA聚合酶Ⅱ和RNA聚合酶Ⅲ。其中RNA聚合酶Ⅱ负责作用于多种基因的转录。在细胞核中存在一些转录调节蛋白因子为RNA聚合酶与启动子结合所必需，如果缺乏这些因子，纯化的RNA聚合酶Ⅱ并不能识别启动子序列，转录只能起始于任意位置。从不同动物细胞，甚至从酵母细胞分离的基本转录因子具有相似的活性。基本转录因子负责识别启动子序列中TATA框，并与RNA聚合酶Ⅱ一起形成转录起始复合物，进而起始转录。已经经过鉴定的普通转录因子有TFⅡD、TFⅡB、TFⅡF、TFⅡA等。按一定顺序参与形