电子传递链与氧化磷酸化.ppt

?复合体Ⅳ(细胞色素氧化酶)*19-13=cytc→O210个亚基中以Ⅰ～Ⅲ构建复合体核心-亚基Ⅰ含血红素aa3和铜离子CuB，形成双核Fe-Cu中心-亚基Ⅱ含有2个铜离子，分别与2Cys-SH连接成双核中心CuA-双核中心CuA的2个铜离子均等共享1e–：还原态为Cu1+Cu1+氧化态为Cu1.5+Cu1.5+-亚基Ⅲ为复合体功能所必需，但作用不详MetHisAspCys自学?复合体Ⅳ的作用机制*以底物方式消耗-O2的还原需要4e–+4H+(=2NADH当量)-cytc?O2的e–传递分两轮进行：1st轮的2e–将O2还原成O22-2nd轮的2e–再将O22-还原成H2O(消耗基质中的4H+)-每个e–通过时还可泵出1H+19-14-总反应：4cytc(还原态)+8HN++O2?4cytc(氧化态)+4HP++2H2OCN–,N3–,CO可抑制自学?复合体Ⅳ还原O2的假设机制*②只有还原态双核中心Fea32+-CuB+才能接受O2，并分别由Fea32+和CuB+各提供e–将其还原为过氧化中间物③cytc提供的3rde–将CuB2+再还原成CuB+④靠近CuB+的O被质子化而引起e–重新分布⑤加上2ndH+和4the–后，导致O-O键断裂并形成羟化中间物⑥再加上2H+后释出2H2O，双核中心返回氧化态①氧化态双核中心Fea33+-CuB2+被来自cytc的2e–分步还原P34-8尚未完全还原的过氧化态中间物始终与复合体紧密结合，直到完全还原成H2O才释出O22–自学*19-16线粒体内膜将两个不同的[H+]区室分开，形成跨膜的化学浓度差(?pH)和电位差(??)，其净效应即是PMF?质子动势(PMF:protonmotiveforce)=e–传递中释出的大部分能量的暂时储存形式生理条件下泵出H+的?G≈20kJ/molG21.22(cf.p341)*Easternskunkcabbage?植物线粒体氧化NADH的不同机制-低照明时可通过类似于非光合物种的e–流传递机制以合成ATP-光照下其线粒体的NADH主要来自于光呼吸产生的Gly缩合成Ser2Gly+NAD+?Ser+NADH+H++CO2+NH4+不受CN–抑制b19-1绕过Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ及其H+泵，将能量直接以热形式耗散以再生出光呼吸所需的NAD+自学2.ATP合成*19-16(3rd)-来自于NADH等可氧化底物的e–通过内膜上的载体而传递-e–流伴随有H+的跨膜转移而形成化学梯度和电位梯度(=PMF)-内膜对H+不通透，只能经由特异通道(Fo)返回基质-驱动H+返回的PMF为ATP的合成提供能量，该偶联反应由结合于Fo的F1复合体所催化内碱外酸在与e–传递相偶联所形成的PMF驱动下，泵入膜间腔的H+经由特殊通道回流至基质，而由此产生的⊿G被用于将ADP+Pi?ATP内负外正ATP合酶chemiosmotichypothesis(1961)1978NPinChem.?电子传递和ATP合成相偶联*-只添加ADP和Pi时，呼吸(O2耗)和ATP合成都很小-添加e–供体如琥珀酸则立即显著增加-加入氰化物后又随即被抑制19-18-已加入琥珀酸的线粒体，其呼吸和ATP合成只有在添加ADP和Pi之后才能进行-氧化磷酸化抑制剂杀黑星霉素/寡霉素可因阻断ATP的合成而抑制呼吸的进行-解偶联剂2,4-二硝基苯酚(DNP)使呼吸继续进行但不能合成ATP干扰ATP合酶使其合成受阻?H+不能返回基质?H+梯度加大导致H+泵停转?e–流停止Cyt(a+a3)?O2*G21.312,4-二硝基苯酚(DNP)-疏水性小分子(弱酸)-具有可解离H+-不影响e–传递和H+泵-可携带H+跨越内膜而破坏其跨膜梯度，进而抑制ATP合成使e–传递和ATP合成相互分离?解偶联剂(uncoupler)Dinitrophenol电子