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不同底物和抑制剂对线粒体氧耗的影响第63页,共89页,星期日,2025年,2月5日复合体Ⅳ:细胞色素c氧化酶还原型Cytc→→O2CuA→a→a3→CuB其中Cyta3和CuB形成的活性部位将电子交给O2。功能:将电子从细胞色素c传递给氧第31页,共89页,星期日,2025年,2月5日由以下实验确定①标准氧化还原电位②拆开和重组③特异抑制剂阻断④还原状态呼吸链缓慢给氧(二)呼吸链成分的排列顺序第32页,共89页,星期日,2025年,2月5日第33页,共89页,星期日,2025年,2月5日抑制剂第34页,共89页,星期日,2025年,2月5日1.NADH氧化呼吸链2.琥珀酸氧化呼吸链第35页,共89页,星期日,2025年,2月5日NADH氧化呼吸链FADH2氧化呼吸链第36页,共89页,星期日,2025年,2月5日线粒体内重要代谢物氧化的途径第37页,共89页,星期日,2025年,2月5日二、氧化磷酸化体内ATP生成的方式:氧化磷酸化(oxidativephosphorylation)是指在呼吸链电子传递过程中偶联ADP磷酸化,生成ATP,又称为偶联磷酸化。底物水平磷酸化(substratelevelphos-phorylation)是底物分子内部能量重新分布,生成高能键,使ADP磷酸化生成ATP的过程。第38页,共89页,星期日,2025年,2月5日(一)氧化磷酸化偶联部位即ATP生成的部位:复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ根据自由能变化和P/O比值⊿Go=-nF⊿EoP/O比值:是指物质氧化时,每消耗1摩尔氧原子所消耗的无机磷的摩尔数,即生成ATP的摩尔数。第39页,共89页,星期日,2025年,2月5日第40页,共89页,星期日,2025年,2月5日三个偶联部位:ATPATPATP①NADH与CoQ之间;②CoQ与Cytc之间;③Cytaa3与氧之间。第41页,共89页,星期日,2025年,2月5日2.自由能变化(△G0′):
大于30.5kJ即可生成1摩尔ATP。
△G0′=-nF△E0′69.5kJ/mol40.5kJ/mol102.3kJ/mol第42页,共89页,星期日,2025年,2月5日ATPATPATP氧化磷酸化偶联部位电子传递链自由能变化第43页,共89页,星期日,2025年,2月5日NADH氧化呼吸链存在3个偶联部位,P/O比值等于3,即产生3molATP。琥珀酸氧化呼吸链存在2个偶联部位,P/O比值等于2,即产生2molATP。第44页,共89页,星期日,2025年,2月5日(二)氧化磷酸化的偶联机制1.化学渗透假说(chemiosmotichypothesis)电子经呼吸链传递时,可将质子(H+)从线粒体内膜的基质侧泵到内膜胞浆侧,产生膜内外质子电化学梯度储存能量。当质子顺浓度梯度回流时驱动ADP与Pi生成ATP。第45页,共89页,星期日,2025年,2月5日第46页,共89页,星期日,2025年,2月5日线粒体基质线粒体膜++++----H+O2H2OH+e-ADP+PiATP化学渗透假说简单示意图第47页,共89页,星期日,2025年,2月5日化学渗透假说第48页,共89页,星期日,2025年,2月5日复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ均有质子泵作用4H+4H+4H+4H+2H+2H+内膜表面基质NADH+H+NAD+琥珀酸延胡索酸?O2+2H+H2O第49页,共89页,星期日,2025年,2月5日第50页,共89页,星期日,2025年,2月5日Q循环第51页,共89页,星期日,2025年,2月5日Q循环第52页,共89页,星期日,2025年,2月5日第53页,共89页,星期日,2025年,2月5日复合体Ⅱ第54页,共89页,星期日,2025年,2月5日2.ATP合酶即复合体Ⅴ。位于线粒体内膜的基质侧。第55页,共89页,星期日,2025年,2月5日ATP合酶F0:为疏水蛋白质,是镶嵌在线粒体内膜中的质子通道。F1:为亲水蛋白质,由?3?3???亚基组成,催化生成ATP。OSCP:寡霉素敏感相关蛋白,位于F0与F1之间,使ATP合酶在寡霉素存在时不
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