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THUNDER细胞因子检测,告别样本的N倍稀释
THUNDERTR-FRET时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)作为一种方便灵活的均相检测技术,现今已成为生命科学基础研究和药物研发中最为常用的
检测方法之一。
THUNDER细胞因子检测,最受追捧的因素有哪些?——多、快、好、省
1)多:覆盖Human和Mouse,常见ILs、IFNs、TNFs、CCLs、CXCLs...
2)快:均相免洗无包被,孵育1~2h即可。
3)好:①动态范围宽,可达4~5log,减少样本稀释。检测上限部分可达30000pg/ml。
信号。②信号稳定:反复读值,信号衰减,延迟读值(过夜或更久),信号稳定可靠。③CV小:板内CV和批间CV均在5%~10%。④完全的数据验证:每
个因子的检测均验证过灵敏度,特异性,准确性,线性范围等数据。
4)省:更灵活:省样本(仅15μl)。省成本,价格比ELISA更优惠。包装更灵活:100~10000pionts均可提供,真正按需购买。
一、THUNDER细胞因子检测技术原理
THUNDER应用双抗夹心TR-FRET技术检测模型,一对特性抗体识别细胞因子后与其结合,用光(320~340nm)激发荧光供体产生FRET(615nm)信号进
而激发荧光受体发射信号(665nm)。信号强度与细胞因子浓度成正比。
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图1:THUNDER细胞因子检测示意图
图2:THUNDER细胞因子检测操作流程示意图
Tips:THUNDERTR-FRET采用的荧光供体为镧系元素EuChelate,区别于HTRFTR-FRET的Cryptate,构象更简单,且保持了足够的稳定性以及耐
受性。
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二、检测数据展示
三、完全验证包括以下几方面核心要素
一、细胞因子—灵敏度(SENSITIVITY)
在进行灵敏度验证时,需要考虑样本中细胞因子的浓度范围、检测方法的最低检测限(LOD)和定量下限(LLOQ)。实验中使用的试剂、缓冲液和操作步骤
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的微小变化都可能影响细胞因子的检测。因此,实验条件的标准化和严格控制对于获得可靠结果至关重要。
图3:HumanIFNγKITSENSITIVITY验证
THUNDER全部Biomaker灵敏度验证均展示在TDS中。
二、细胞因子—精密度(PRECISION)
1、细胞因子—INTRA-ASSAYPRECISION
在细胞因子检测中,分析内测定重复性(Intra-assayPrecision)是指在相同实验条件下,对同一样本进行多次测量所得结果之间的一致性。它反映了实验操
作的稳定性和可靠性,是评估检测方法性能的重要指标之一。分析内重复性的高低直接影响到实验结果的可信度和实验数据的统计分析质量。
THUNDER检测,在同一板上分别对三个已知浓度(低、中、高)的样品进行了20次测试,以评估分析内重复性。该检测在384孔板中进行,标准品和
样品在
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