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第2章细胞工程首个体细胞克隆动物克隆动物多莉羊体细胞克隆猴“中中”和“华华”如何能让名贵的兰花大量、快速地繁殖?
细胞工程是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。动物细胞工程植物细胞工程原理操作水平目的1.细胞工程的概述
哈伯兰特提出了细胞全能性的理论,但相关的实验尝试没有成功。斯图尔德等发现胡萝卜的体细胞可以分化为胚,为细胞全能性理论提供了强有力的支持。科金用真菌的纤维素酶分解番茄根的细胞壁,成功获得了原生质体古哈等在培养毛曼陀罗的花药时,首次得到了由花药中的花粉粒发育而来的胚。卡尔森诱导烟草种间原生质体融合,获得了第一株体细胞种间杂种植株。土壤农杆菌的Ti质粒被发现。之后,该质粒应用于植物分子生物学领域,促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合。1902年1958年1960年1964年1971年1974年P32【科技探索之路】植物细胞工程的发展历程
植物组织培养植物体细胞杂交2.1.1植物细胞工程的基本技术学习目标:
现象:有些植物具有很强的再生能力,利用一根枝条或一片叶子能培养出完整的植株,2.1.1植物细胞工程的基本技术思考:细胞的全能性能
1、定义:2、原因:生物体的每一个细胞都含有该物种全套的。细胞的全能性遗传信息(基因)3、全能性大小:>>?受精卵生殖细胞体细胞胚胎干细胞成体干细胞>?植物细胞动物细胞>>细胞经过分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。一般来说,细胞分化程度越高,细胞全能性越低。
4、为什么生物体内细胞并没有表现出全能性,而是分化成为不同的组织器官?基因在特定的时间和空间条件下表达的结果离体营养物质、植物激素适宜的温度、光照(适时)、pH、无菌等外界条件???选择性5、植物细胞表现出全能性的条件:
2.原理:1.概念:指将的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成的技术。离体完整植株植物细胞的全能性、外植体一、植物组织培养3.繁殖方式:无性繁殖——实现植物细胞全能性的技术
外植体脱分化愈伤组织再分化芽、根完整植株外植体如何选取?如何消毒?接种时应注意什么?阅读课本P35-37探究实践“菊花的组织培养”思考:3min一、植物组织培养愈伤组织有什么特点?什么是脱分化和再分化?影响的关键因素是什么?整个过程需要怎样的培养基?
植物组织培养外植体:3)接种:活的离体的植物器官、组织、细胞。最好选取幼嫩的部位,例如嫩叶、嫩茎、芽、胡萝卜的形成层部位等。1)要消毒容易诱导形成愈伤组织酒精消毒30s无菌水2~3次次氯酸钠30min无菌水2~3次2)用无菌的解剖刀将外植体切成0.5~1cm长的小段在酒精灯火焰旁,将外植体的1/3~1/2插入诱导愈伤组织的培养基中。封口、标记培养基和所有器械都要灭菌,整个试验在超净工作台上进行,保持无菌!形态学下端朝下,不要倒插。
结果:脱分化已经分化的细胞,经诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化的细胞。形成愈伤组织激素影响因素:(特点:排列疏松、不定形的薄壁细胞团,具有很强的分裂能力)还有:营养物质(有机碳源)、温度、pH、避光等植物组织培养外植体经脱分化会形成愈伤组织(生长素/细胞分裂素比值适中)异养生活
影响因素再分化脱分化产生的愈伤组织在一定的培养条件下重新分化成芽、根等器官的过程。生长素/细胞分裂素偏低,利于的分化;生长素/细胞分裂素偏高,利于的分化还有营养物质、温度、pH、需光等植物组织培养芽根光照诱导叶绿素的形成,使试管苗能进行光合作用培养15~20d后,将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽的培养基上培养。长出芽后,再将其转接到诱导生根的培养基上,进一步诱导形成试管苗。激素:
炼苗移栽培养移栽前先打开封口膜或瓶盖,让试管苗在培养箱内生长几日。用流水清洗掉根部的培养基后,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中,待其长壮后再移栽入土。每天观察并记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花。
试管苗为什么要移栽到消毒的蛭石或珍珠岩试管苗之所以要移栽到消毒的蛭石或珍珠岩中,是因为这些材料具有良好的透气性和排水性,有利于试管苗的生长发育,并且能有效减少病害的发生。蛭石或珍珠岩的多孔性结构使得它们能够支持植物根部的发展,同时允许空气和水分子在基质内部自由流动,这对植物的生长至关重要。12此
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