3.2基因工程的基本操作程序（分层练习）（原卷版）.docx

3.2基因工程的基本操作程序

一、单项选择题：

1．某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，下列有关PCR扩增过程相关叙述不正确的是()

A．为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的限制性核酸内切酶位点

B．设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对，而造成引物自连

C．PCR扩增时，复性温度的设定与引物长度、碱基组成无关

D．如果PCR反应得不到任何扩增产物，则需要降低退火温度或重新设计引物

2．基因表达载体的构建是基因工程的核心。下列关于干扰素基因表达载体的叙述，正确的是()

A．干扰素基因可通过从造血干细胞中获取mRNA并反转录获得

B．复制原点可使干扰素基因在受体细胞中存在，并遗传给下一代

C．启始密码子和终止子在干扰素基因的转录中均发挥着重要作用

D．抗生素抗性基因的存在有助于干扰素基因在受体细胞中的表达

3．下列关于目的基因的检测与鉴定的叙述，错误的是()

A．目的基因在真核细胞中能否稳定遗传的关键是目的基因是否插入质粒DNA中

B．检测受体细胞是否含有目的基因及其是否成功转录的方法都是分子杂交法

C．目的基因的鉴定通常是在个体水平上进行的

D．如在受体细胞内检测到目的基因表达的蛋白质，可确定目的基因首端含有启动子

4．在基因表达载体的构建中，下列说法正确的是()

①一个基因表达载体的组成只包括目的基因、启动子、终止子②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止④所有基因表达载体的构建是完全相同的⑤必须在细胞外进行

A．一个 B．两个

C．三个 D．四个

5．科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白，治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计中，不合理的是()

A．构建表达载体除了目的基因，还需要启动子、终止子、复制原点、标记基因

B．用含有四环素的培养基可以筛选出已经导入含标记基因的大肠杆菌

C．小鼠的β-珠蛋白基因可以直接转给大肠杆菌进行表达得到β-珠蛋白

D．用Ca2＋处理大肠杆菌后，表达载体易于导入大肠杆菌中

6．基因工程、细胞工程都可以克服远缘杂交不亲和的障碍，在农作物新品选育等方面具有广阔的前景和较高的应用价值。下列叙述错误的是（）

A．实验室中将目的基因导入植物细胞采用最多、最有效的方法是显微注射法

B．农杆菌转化法的原理是Ti质粒中的T-DNA具有转移到受体细胞并整合到受体细胞DNA上的特性

C．植物体细胞杂交诱导原生质融合时常用聚乙二醇（PEG）做诱导剂

D．含有目的基因的细胞或融合形成的杂种细胞能培育成植株的理论基础是细胞的全能性

7．单个B细胞抗体技术可用于制备高亲和力、高特异性的单抗，其技术流程如下：①康复者单个B淋巴细胞的分离和筛选；②利用RT-PCR获取和扩增抗体基因；③构建基因表达载体；④将抗体基因导入动物细胞；⑤单抗的筛选和鉴定。下列叙述错误的是（）

A．操作①选用单个B淋巴细胞以保证最终获得纯度较高的单抗

B．操作②使用的PCR反应体系常添加Mg2+以激活DNA聚合酶

C．操作③常用两种限制酶切割抗体基因和载体以防止其自身环化

D．操作④前可用Ca2+处理受体细胞促使其主动吸收DNA分子

8．某闭花传粉植物的花色有红色和白色两种，由基因M、m控制；花的位置有顶生和腋生两种，由基因N、n控制。研究人员进行了以下两个实验：

实验一：用红花腋生植株人工传粉给白花顶生植株，F1表型及其比例为红花腋生：红花顶生=1：1，F1中红花腋生植株自花受粉，F2表型及其比例为红花腋生：红花顶生：白花腋生：白花顶生=6：3：2：1。

实验二：从F1两种表型中各选取一株，对它们和两个亲本的两对基因（M、m和N、n）进行PCR扩增，然后进行电泳分离，结果如下图。已知：①条带1和2是一对等位基因的条带，条带3和4是另一对等位基因的条带；②图谱二为实验一中亲代红花腋生植株的电泳图谱。下列说法错误的是（）

A．两对相对性状中，显性性状分别是红花、腋生

B．条带1、4分别代表的基因是m、N

C．F2表型出现的原因可能是基因型为NN的个体完全致死

D．F2表型出现的原因可能是含有基因N的花粉50%致死

9．东南景天中的HMA3基因能编码Cd（镉）转运蛋白，Cd转运蛋白能将土壤中的Cd吸收进体内，现欲将东南景天中的HMA3基因转入栾树，以增强栾树对Cd的富集能力，从而有效治理Cd污染，科研人员利用下图结构构建重组DNA，图1为HMA3基因所在DNA示意图，图2为质粒结构示意图，下列叙述正确的是（????）

A．欲获取HMA3基因，可用引物1、引物2进行PCR循环至少2轮获得

B．用凝胶电泳鉴定PCR产物，引物1、引物2扩增的产