3.1 重组DNA技术的基本工具课件-【知识精研】高二生物 （人教版2019选择性必修3）.pptx

;学习目标、重难点;我国是棉花的生产和消费大国，但棉花种植中易受虫害，其中以棉铃虫最为主，可以使棉花产量减少三分之一，甚至绝收。;基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。;【问题1】为什么不同生物的DNA分子能拼接起来？;一、基因工程的理论基础;一、基因工程的理论基础;一、基因工程的理论基础;“分子手术刀”;;①;二、限制性内切核酸酶（限制酶）;拓展——限制酶的命名：;（1）实例1——EcoRⅠ限制酶切割

*EcoRⅠ识别序列为GAATTC

*EcoRⅠ切割部位为GA之间的磷酸二酯键;【练习1】：写出下列限制酶切割形成的黏性末端

BamHⅠ________EcoRⅠ________HindⅢ________BglⅡ________;【练习2】下面哪项不具有限制酶识别序列的特征（）;不能，限制酶只能识别并切开双链DNA分子。

;【练习5】把两种来源不同的DNA分子进行拼接，应该怎样处理呢？;;二;5′;;三、DNA连接酶;1.(2022·天津耀华中学高二期中)以下是几种不同限制酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列叙述正确的是（）;质粒:;问题1：载体要与外源基因连接，需要具备什么条件？

问题2：要使携带的外源基因在受体细胞中稳定存在，载体需要具备什么条件？

问题3：我们用肉眼看不到载体是否进入受体细胞，为了便于筛选重组DNA分子，载体需要具备什么条件？;有标记基因的存在，可用含青霉素的培养基鉴别。

不能被酶切破坏

便于重组DNA筛选与鉴定;请你根据图3-3中的相关信息找到两条片段上EcoRI的识别序列和切割位点。然后，用剪刀进行“切割”。待切割位点全部切开后，将从下面那条DNA链上切下的片段重组到上面那条DNA链的切口处，并用透明胶条将切口粘连起来。;HindIII和BamHI;30;;2.某实验小组利用下图所示质粒和目的基因来构建基因表达载体,将目的基因导入大肠杆菌细胞并表达。下列叙述正确的是()

A.图中的质粒用酶A切割后,会产生8个游离的磷酸基团

B.在构建重组质粒???,可用酶A和酶C切割质粒和目的基因

C.成功导入目的基因的大肠杆菌可在含四环素的培养基中生长

D.若用酶B和酶C切割,可以避免质粒的自身环化;;实验：DNA的粗提取与鉴定;DNA含量相对较高的生物组织，如新鲜洋葱、香蕉、菜花和猪肝等。;实验：DNA的粗提取与鉴定;破碎细胞;破碎细胞;实验组;（1）你提取出白色丝状物或沉淀物了吗？用二苯胺试剂鉴定的结果如何？;课后训练;课后训练;课后训练;课后训练;课后训练