种子扩大培养课件.pptVIP

分批培养的优缺点优点操作简单，周期短，染菌机会少，生产过程和产品质量容易掌握缺点存在底物抑制或限制问题，对于底物类型及初始浓度敏感的次级代谢物就不适用，设备利用效率较低，产率不高。21在分批培养过程中补入新鲜的料液，以克服营养不足而导致的发酵过早结束的缺点。在此过程中只有料液的加入没有料液的取出，所以发酵结束时发酵液体积比发酵开始时有所增加。在工厂的实际生产中采用这种方法很多。补料分批培养0102缺点由于没有物料取出，产物的积累最终导致比生产速率的下降。由于有物料的加入增加了染菌机会优点在这样一种系统中可以维持低的基质浓度，避免快速利用碳源的阻遏效应；可以通过补料控制达到最佳的生长和产物合成条件；还可以利用计算机控制合理的补料速率，稳定最佳生产工艺。补料分批培养的优缺点在补料分批培养的基础上间歇放掉部分发酵液（带放）称为半连续培养。优点放掉部分发酵液，再补入部分料液，使代谢有害物得以稀释有利于产物合成，提高了总产量。缺点代谢产生的前体物被稀释，提取的总体积增大030201半连续培养种子扩大培养种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养而获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。种子扩大培养应根据菌种的生理特性，选择合适的培养条件来获得代谢旺盛、数量足够的种子。01培养良好的种子接入发酵罐后，将使发酵生产周期缩短，设备利用率提高。种子液质量的优劣对发酵生产起着关键性的作用。02优良种子应具备的条件活力强生理状态稳定菌体数量浓度达到要求无杂菌污染适应性强，能保证稳定生产种子质量的判定通常测定的参数包括01pH02培养基中营养物质的含量03菌丝形态、色泽、浓度04酶活，溶解氧，尾气等05实验室阶段：不用种子罐，所用的设备为培养箱、摇床等实验室常见设备，在工厂这些培养过程一般都在菌种室完成，因此将这些培养过程称为实验室阶段的种子培养。培养物选择的原则目的：种子扩培到一定的量和质，根据菌种的特点最终的培养物可分为两类：对于不产孢子和芽胞的微生物——获得一定数量和质量的菌体对于产孢子的微生物获得一定数量和质量的孢子，获得一定数量和质量的菌丝体实验室阶段斜面培养基接种法用途：常用于扩大纯种细菌及实验室保存菌种。操作方法：菌操作法用接种环挑取单个菌落，自斜面底向上划一直线，然后再从底向上轻轻来回作蜿蜒划线。通过火焰，塞上棉塞，接种环烧灼后方可放下。置37℃温箱孵育18-24小时，取出观察斜面上菌苔生长情况。生产车间种子的制备01孢子或摇瓶菌丝在实验室中制备好后，即可转移到种子罐中扩大培养。02种子罐的作用是使有限的数量的孢子或菌丝生长繁殖成大量的菌丝体。03种子罐的培养基虽因不同菌种而异，但其原则为采用易被菌利用的成分如葡萄糖、玉米浆、磷酸盐等，同时还需供给足够的无菌空气，并不断搅拌01.培养物的选择原则：02.在生产车间阶段，最终一般都是获得一定数量的菌丝体。03.缩短发酵时间04.有利于获得好的发酵结果05.菌丝体比孢子要有利：生产车间阶段种子扩大的级数指制备种子需逐级扩大培养的次数，需要根据菌种的生长繁殖速率，发酵罐的容积综合确定。1一级种子二级发酵：谷氨酸棒杆菌2二级种子三级发酵：青霉菌3三级种子四级发酵：灰色链霉菌4种子罐的级数越少，越有利于简化工艺和控制，并可减少由于多次移种而带来染菌的机会。但也必须考虑尽量延长发酵罐生产产物的时间，缩短由于种子发芽、生长而占用的非生产时间，以提高发酵罐的生产率。种龄与接种量种龄：种子的培养时间。接种量：移入的种子液体积和接种后培养液体积的比例。双种：两个种子罐接种到一个发酵罐中。倒种：一部分种子来源于种子罐，一部分来源于发酵罐。影响种子质量的因素原材料质量一般情况：培养基糖分相对要少，氮源要多，无机盐所占的比例要大。种子罐和发酵罐培养基成分趋于一致也有好处，种子很快适应，但各成分的数量根据目的各自确定。培养条件如温度、PH值、湿度、培养时间和冷藏时间等都影响种子质量。种子质量的控制菌种的稳定性检查与复壮无杂菌检查制备过程01安培管02→斜面孢子03→大米孢子04→一级种子05→二级种子06→发酵07青霉素生产的种子制备斜面孢子01培养基：甘油、葡萄糖、蛋白胨等培养基特点：有利于长孢子，用量少而精细培养条件：25℃、7天,注意湿度50%左右02大米孢子的要求：1粒米含1.4*106个孢子培养基：大米及氮源（玉米