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课题3血红蛋白的提取与分别
一、选择题
1.凝胶色谱法是依据()分别蛋白质的有效方法。()
A.分子的大小 B.相对分子质量的大小
C.带电荷的多少 D.溶解度
[答案]B
[解析]凝胶色谱法分别蛋白质依据的是蛋白质相对分子质量的大小。
2.缓冲液的作用是:在肯定范围内,抵制外界的影响来维持()基本不变()
A.温度 B.pH
C.渗透压 D.氧气浓度
[答案]B
[解析]缓冲液可维持溶液在肯定范围内的pH稳定。
3.电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷()的电极移动()
A.相同 B.相反
C.相对 D.相向
[答案]B
[解析]电泳时,离子移动的方向应与其所带电荷相反。
4.在蛋白质的提取和分别中,关于对样品处理过程中,分析无误的是()
A.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐
B.洗涤时离心速度过低,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分别的效果
C.洗涤过程选用0.1%的生理盐水
D.透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质
[答案]D
[解析]在蛋白质的提取和分别中,透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质。
5.下列操作正确的是()
A.分别红细胞时采纳低速长时间离心
B.红细胞释放出血红蛋白只须要加入蒸馏水即可
C.加样之前不须要调整缓冲液的液面
D.透析时要用20mmol/L的磷酸缓冲液,透析12h
[答案]D
二、非选择题
6.红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的,血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行试验,来提取和分别血红蛋白,请回答下列有关问题:
(1)血红蛋白提取和分别的程序可分为四步:________、________、________和________。
(2)试验前取簇新的血液,切记要在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,立刻进行离心,收集血红蛋白溶液。
①加入柠檬酸钠的目的是___________________________________________________。
②以上所述的过程即是样品处理,它包括________、________、收集血红蛋白溶液。
③收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析,这就是样品的粗分别。
(3)①透析的目的是_______________________________。
②透析的原理是____________________________________________________。
(4)纯度鉴定时最常用的方法是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。
①样品纯化的目的是_________________________________________________。
②血红蛋白有什么特点____________________________。这一特点对进行蛋白质的分别有什么意义?___________________________________________________。
[答案](1)样品处理粗分别纯化纯度鉴定
(2)①防止血液的凝固②红细胞的洗涤血红蛋白的释放
(3)①除去相对分子质量较小的杂质②透析袋能使小分子物质自由进出,而大分子物质被保留在袋内
(4)①通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去②血红蛋白呈现红色在用凝胶色谱法分别时可以通过视察颜色来推断什么时期应当收集洗脱液;同时通过视察颜色使血红蛋白的分别过程特别直观,大大简化了试验操作
[解析]本题主要考查蛋白质提取和分别的相关学问,详细分析如下:
一、选择题
1.为防止血液凝固,在采血容器中要预先加入下列哪一种抗凝血剂()
A.NaCl B.甲苯
C.蒸馏水 D.柠檬酸钠
[答案]D
[解析]柠檬酸钠是血液常用的凝固剂。
2.将搅拌好的混合液转移到离心管中,离心后,可以明显看到试管中的溶液分为4层,其中第3层是()
A.无色透亮的甲苯层
B.脂溶性物质的沉淀层
C.血红蛋白的水溶液
D.其他杂质的暗红色沉淀物
[答案]C
[解析]混合液离心后的第3层为血红蛋白的水溶液。
3.红细胞的洗涤过程错误的是()
A.低速短时间离心,如500r/min离心2min
B.离心后用胶头吸管吸出上层透亮的黄色血浆
C.将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯,再加入五倍体积的蒸馏水
D.直至上清液中没有黄色,表明红细胞已洗涤干净
[答案]C
4.在装填凝胶柱时,不得有气泡存在的缘由是()
A.气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分别效果
B.气泡阻碍蛋白质的运动
C.气泡
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