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专题25基因工程与蛋白质工程
【5年高考】
考点一基因工程的原理与技术
1.(2024江苏单科,16,2分)下列生物技术操作对遗传物质的改造,不会遗传给子代的是 ()
A.将胰岛素基因表达质粒转入大肠杆菌,筛选获得基因工程菌
B.将花青素代谢基因导入植物体细胞,经组培获得花色变异植株
C.将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵,培育出产低乳糖牛乳的奶牛
D.将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者,进行基因治疗
答案D
2.(2024江苏单科,33,8分)假如已知一小段DNA的序列,可采纳PCR的方法,简捷地分析出已知序列两侧的序列,详细流程如图(以EcoRⅠ酶切为例):
请据图回答问题:
(1)步骤Ⅰ用的EcoRⅠ是一种酶,它通过识别特定的切割特定位点。?
(2)步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3-羟基与5-磷酸间形成;PCR循环中,升温到95℃是为了获得;TaqDNA聚合酶的作用是催化。?
(3)若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物,步骤Ⅲ选用的PCR引物必需是(从引物①②③④中选择,填编号)。?
DNA序列(虚线处省略了部分核苷酸序列)
已知
序列
PCR
引物
①5-AACTATGCGCTCATGA-3
②5-GCAATGCGTAGCCTCT-3
③5-AGAGGCTACGCATTGC-3
④5-TCATGAGCGCATAGTT-3
(4)对PCR产物测序,经分析得到了片段F的完整序列。下列DNA单链序列中(虚线处省略了部分核苷酸序列),结果正确的是。?
A.5-AACTATGCG…………AGCCCTT-3
B.5-AATTCCATG…………CTGAATT-3
C.5-GCAATGCGT…………TCGGGAA-3
D.5-TTGATACGC…………CGAGTAC-3
答案(1)限制性核酸内切(或限制)核苷酸序列(2)磷酸二酯键DNA单链以DNA为模板的DNA链的延长(3)②④(4)B
3.(2024江苏单科,33,8分)图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图,载体质粒P0具有四环素抗性基因(tetr)和氨苄青霉素抗性基因(ampr)。请回答下列问题:
图1
(1)EcoRⅤ酶切位点为…GAT↓ATC…
…CTA↑TAG…,EcoRⅤ酶切出来的线性载体P1为末端。?
(2)用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段,其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。载体P1用酶处理,在两端各添加了一个碱基为的脱氧核苷酸,形成P2;P2和目的基因片段在酶作用下,形成重组质粒P3。?
(3)为筛选出含有重组质粒P3的菌落,采纳含有不同抗生素的平板进行筛选,得到A、B、C三类菌落,其生长状况如下表(“+”代表生长,“-”代表不生长)。依据表中结果推断,应选择的菌落是(填表中字母)类,另外两类菌落质粒导入状况分别是、。?
菌落类型平板类型
A
B
C
无抗生素
+
+
+
氨苄青霉素
+
+
-
四环素
+
-
-
氨苄青霉素+四环素
+
-
-
(4)为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒,拟设计引物进行PCR鉴定。图2所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置,PCR鉴定时应选择的一对引物是。某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400bp片段,缘由是。?
图2
答案(1)平(2)胸腺嘧啶(T)DNA连接(3)BA类菌落含有P0C类菌落未转入质粒(4)乙丙目的基因反向连接
4.(2024江苏单科,32,8分)为生产具有特定性能的α-淀粉酶,探讨人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因(1656个碱基对),利用基因工程大量制备α-淀粉酶,试验流程见图。请回答下列问题:
(1)利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前,需先获得细菌的。?
(2)为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接,需在引物的端加上限制性酶切位点,且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点,主要目的是。?
(3)进行扩增时,反应的温度和时间需依据详细状况进行设定,下列选项中的设定与引物有关,的设定与扩增片段的长度有关。(填序号)?
①变性温度②退火温度③延长温度④变性时间
⑤退火时间⑥延长时间
(4)如图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列:
5-AUGCCAUCAACAAAUACUAACACUU……-3
图中虚线框内mRNA片段包
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