动物细胞培养课件-高二下学期生物人教版选择性必修33.pptx

2.2.1动物细胞培养第二章第1节动物细胞培养

从社会中来1.怎样才能获得大量的自体健康皮肤？2.能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤？可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增。

1、概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。2、目的：获得细胞或细胞产物；不能获得完整动物个体。3、原理：细胞增殖（有丝分裂）那么，动物细胞的培养需要哪些条件呢？动物细胞培养动物体组织单个细胞细胞生长和增殖取出分散适宜条件4、地位：是动物细胞工程的基础

一、动物细胞培养的条件1.人体内细胞生活的环境是？细胞进行正常生命活动的必要条件是什么？2.在体外模拟体内进行动物细胞培养需要满足哪些条件？内环境内环境的成分和理化性质处于相对稳定的状态成分：营养物质、代谢废物适宜的温度、pH、渗透压动物细胞培养的条件营养条件适宜的温度、pH、渗透压无菌无毒的环境气体环境

任务一：阅读课本P43-44动物细胞培养的条件，思考以下问题1.培养基的构成；加入血清的作用是什么？2.如何创造无菌无毒的环境？定期更换培养液的作用？如果要防止细菌污染，可以加入什么物质？3.适宜的温度、pH和渗透压分别是多少？它们分别如何影响动物细胞生命活动？4.适宜的气体环境包括？分别有什么作用？如何保持该气体环境？①适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以___________为宜；②适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为________；③适宜的渗透压：培养基的构成：合成培养基+血清等天然成分补充细胞所需的未知营养成分液体培养基（培养液）①培养液、培养用具：灭菌处理；②在无菌环境下进行操作；③定期更换培养液；④培养液中添加一定量的抗生素。36.5±0.5℃等渗溶液：维持细胞正常的形态和功能影响酶的活性培养皿或松盖培养瓶CO2培养箱置于

动物组织块分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代培养机械方法（剪碎）+胰蛋白酶或胶原蛋白酶问题细胞分裂受阻悬浮生长贴壁生长密度过大、有害代谢物积累和营养物质缺乏等接触抑制离心胰蛋白酶+离心分瓶制成细胞悬液加培养液取材：幼龄动物细胞（细胞分化程度低、分裂能力强，易培养）分瓶原因原因要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附使细胞从瓶壁上脱离下来并分散成单个细胞加培养液方法

任务二：阅读课本P44-45动物细胞培养的过程，思考以下问题2.如何将动物组织分散成单个细胞？说明细胞间的物质主要成分是？3.分散细胞时为何不选用胃蛋白酶？1.为什么将组织块分散成单个细胞？4.体外培养动物细胞有哪些类型？5.细胞分裂一段时间分裂会受阻，原因是什么？如何让细胞继续增殖？6.细胞贴壁、接触抑制、原代培养、传代培养分别指什么？有利于细胞从培养液中吸收营养物质和O2，排出代谢物。机械方法（剪碎）+胰蛋白酶或胶原蛋白酶蛋白质多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶适宜pH为1.5左右，在此环境中会失活。悬浮生长、贴壁生长悬浮生长：贴壁生长：细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等、接触抑制（要控制好作用时间，否则会分解细胞膜蛋白）

取动物组织制成细胞悬液原代培养CO2培养箱CO2培养箱传代培养将组织分散成单个细胞分瓶继续培养动物细胞培养的过程

细胞贴壁过程贴壁生长与接触抑制要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附(1)细胞贴壁:悬液中分散的细胞贴附在瓶壁生长的现象；(2)接触抑制:贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞停止分裂增殖的现象

思考讨论2.植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基培养基特有成分过程结果相同点固体培养基葡萄糖、动物血清液体培养基细胞增殖植物细胞的全能性蔗糖、植物激素外植体↓脱分化愈伤组织↓再分化芽、根↓移栽植物体动物的组织↓机械法或蛋白酶细胞悬液↓原代培养↓细胞悬液↓传代培养许多细胞新的植株①都进行有丝分裂，不涉及减数分裂；②均需无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件

任务三：阅读课本P46干细胞培养及其应用，思考以下问题1.干细胞有哪些类型？这些类型各有怎样的特点和哪些方面的应用？2.科学家怎样获得iPS细胞的？这种细胞与胚胎干细胞相比，有哪些应用优势？3.干细胞用于临床治疗可能存在什么风险？受精卵原始胚胎干细胞囊胚胎儿成人胚胎干细胞成体干细胞