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药物诱导法·DNA合成阻断法:采用DNA合成抑制剂抑制DNA合成。高浓度的胸腺嘧啶能够阻断DNA合成所需的核苷酸的合成,即不能合成DNA,细胞不能进入S期,最终将细胞群阻断于G1/S交界处。一般采用两次DNA合成抑制剂处理。优点是同步化效率高,几乎适合于所有体外培养的细胞体系。缺点是诱导过程可造成细胞非均衡生长。第30页,共86页,星期日,2025年,2月5日TdR阻断法进行细胞同步化第31页,共86页,星期日,2025年,2月5日分裂中期阻断法:通过抑制微管聚合来抑制细胞分裂器的形成,将细胞阻断在细胞分裂中期。优点是操作简便,效率高。缺点是这些药物的毒性相对较大。常用药物是秋水仙素。第32页,共86页,星期日,2025年,2月5日◆条件依赖性突变株在细胞周期同步化中的应用:将与细胞周期调控有关的条件依赖性突变株转移到限定条件下培养,所有细胞便被同步化在细胞周期中某一特定时期。第33页,共86页,星期日,2025年,2月5日(五)特异的细胞周期特异的细胞周期是指那些特殊的细胞所具有的与标准的细胞周期相比有着鲜明特点的细胞周期。◆爪蟾早期胚胎细胞的细胞周期◆酵母细胞的细胞周期◆植物细胞的细胞周期◆细菌的细胞周期第34页,共86页,星期日,2025年,2月5日爪蟾早期胚胎细胞的细胞周期·细胞分裂快,G1期、G2期非常短,S期也短(所有复制子都激活),以至认为仅含有S期和M期,无需临时合成其它物质,子细胞在G1、G2期并不生长,越分裂体积越小·细胞周期调控因子和调节机制与一般体细胞标准的细胞周期基本是一致的第35页,共86页,星期日,2025年,2月5日爪蟾早期胚胎细胞的细胞周期第36页,共86页,星期日,2025年,2月5日酵母细胞的细胞周期酵母细胞的细胞周期与标准的细胞周期在时相和调控方面相似。·酵母细胞周期明显特点:酵母细胞周期持续时间较短;封闭式细胞分裂,即细胞分裂时核膜不解聚纺锤体位于细胞核内;在一定环境下,也进行有性繁殖第37页,共86页,星期日,2025年,2月5日芽殖酵母的细胞周期起始点过后,细胞出芽进入S期纺锤体装配与S期DNA复制同时进行。第38页,共86页,星期日,2025年,2月5日裂殖酵母的分裂周期第39页,共86页,星期日,2025年,2月5日均等分裂,细胞生长仅是细胞长度的增加起始点有明显形态学标志裂殖酵母芽殖酵母第40页,共86页,星期日,2025年,2月5日植物细胞的细胞周期植物细胞的细胞周期与动物细胞的标准细胞周期非常相似,含有G1期、S期、G2期和M期四个时期。·植物细胞不含中心体,但在细胞分裂时可以正常组装纺锤体。·植物细胞以形成中间板的形式进行胞质分裂第41页,共86页,星期日,2025年,2月5日植物细胞的细胞周期第42页,共86页,星期日,2025年,2月5日细菌的细胞周期慢生长细菌细胞周期过程与真核细胞周期过程有一定相似之处。其DNA复制之前的准备时间与G1期类似。分裂之前的准备时间与G2期类似。再加上S期和M期,细菌的细胞周期也基本具备四个时期。第43页,共86页,星期日,2025年,2月5日快速生长时,细胞周期有较大的变化,细菌分裂一次仅需35min。而完成一次DNA复制需要40min,DNA复制前准备(G1)约10min;分裂前准备(G2)约20min;一个周期70min。·细菌在快速生长情况下,如何协调快速分裂和最基本的DNA复制速度之间的矛盾?在上一次细胞分裂结束时,细胞内的DNA已经复制到一半。第44页,共86页,星期日,2025年,2月5日第45页,共86页,星期日,2025年,2月5日二、有丝分裂(mitosis)●前期(prophase)●前中期(prometaphase)●中期(metaphase)●后期(anaphase)●末期(telophase)第46页,共86页,星期日,2025年,2月5日第47页,共86页,星期日,2025年,2月5日前期(prophase)◆标志前期开始的第一个特征是染色质开始浓缩形成有丝分裂染色体◆第二个特征细胞骨架解聚,有丝分裂纺锤体开始装配◆Golgi体、ER等细胞器解体,形成小的膜泡这种染色体由两条染色单体(chromatid)构成 ·在前期末,染色体主缢痕部位形成一种蛋白复 合物称为动粒(kinetochore)第48页,共86页,星期日,2025年,2月5日 间期动物细胞含一个MTOC,即中心体,在S期末,两个中心
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