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关于病毒与寄主的相互作用第1页,共41页,星期日,2025年,2月5日烈性噬菌体感染后短时间内能连续完成繁殖过程而使宿主细胞裂解的噬菌体。比如T噬菌体系列(T1-T7)。噬菌体与细菌的相互作用第2页,共41页,星期日,2025年,2月5日烈性噬菌体——T4噬菌体典型的蝌蚪状外形:六角形的头部和可收缩的长的尾部;头部的蛋白质外壳内含有折叠的DNA分子;头部大小为9060纳米(nm),尾部10020纳米。是研究最广泛和深入的细菌噬菌体,侵染大肠杆菌B菌株。第3页,共41页,星期日,2025年,2月5日繁殖过程(烈性噬菌体):第4页,共41页,星期日,2025年,2月5日吸附:最初的吸附是随机的,当噬菌体以尾丝作为吸附点,通过尾部的刺突与细菌的表面的特殊受体相结合后,则具有特异性侵入:噬菌体通过收缩尾鞘,将核酸物质注入寄主细胞内噬菌体的复制烈性噬菌体的复制过程包括核酸的复制、蛋白质壳体(头部、尾部和尾丝)和释放噬菌体所需要的酶,该过程是一个非常复杂的过程噬菌体的复制:第5页,共41页,星期日,2025年,2月5日增殖过程的3阶段转录:大第6页,共41页,星期日,2025年,2月5日第7页,共41页,星期日,2025年,2月5日装配、释放噬菌体的各个部分有序地组装在一起,形成完整的病毒粒子,成熟的病毒粒子引起寄主细胞的裂解,释放处病毒粒子第8页,共41页,星期日,2025年,2月5日第9页,共41页,星期日,2025年,2月5日烈性噬菌体感染细菌的结果:液体培养基:浑浊菌液变清亮双层(上层含菌)固体平板:出现噬菌斑一步生长曲线(Debruck,1939)定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线,用于反映各种噬菌体潜伏期、裂解期和裂解量的特征曲线。第10页,共41页,星期日,2025年,2月5日裂解期:平稳期:效价最高期裂解量:每个受染细胞产生的噬菌体的总数。(平稳期pfu/受染细胞?)潜伏期:(侵入到装配):隐悔期;胞内累计期第11页,共41页,星期日,2025年,2月5日温和噬菌体感染后其基因组整合到宿主的基因组上,并随宿主基因组的复制而同步,而不引起宿主细胞的裂解。比如P1和λ噬菌体。温和噬菌体溶原菌:受温和噬菌体感染的宿主称之为溶原菌。前噬菌体:整合在宿主基因组上的温和噬菌体的核酸。第12页,共41页,星期日,2025年,2月5日线形dsDNA,分子为48.5kb;编码61个基因,其中38个较为重要;生活史可分为裂解周期和溶原周期;为中等大小的温和噬菌体;温和噬菌体——λ噬菌体溶源原因----合成阻遏蛋白(CI蛋白),阻遏某些基因的转录;-----关闭某些噬菌体蛋白基因(晚期蛋白)的表达----整合酶的合成(int基因编码)整合位点λ噬菌体的整合位点尽限于gal及bio等少数几个基因内。第13页,共41页,星期日,2025年,2月5日λ噬菌体整合过程第14页,共41页,星期日,2025年,2月5日温和性噬菌体的去向:自发裂解:机率较小,10-5诱发裂解:用物理、化学因素处理,诱导原噬菌体复制,导致寄主细胞裂解多数情况:噬菌体进入寄主细胞后,将其核酸整合到寄主的染色体上,或游离在寄主的细胞质中,并随着寄主细胞的生长繁殖而传下去,宿主细胞不裂解少数情况:原噬菌体进行复制,装配成为成熟噬菌体,使寄主裂解裂解方式:第15页,共41页,星期日,2025年,2月5日λ噬菌体感染结果第16页,共41页,星期日,2025年,2月5日溶原细菌的特点:可以自发的消除噬菌体DNA,但不能自发产生;2.温和噬菌体可以自发或人工诱发变为毒性噬菌体;3.溶原细菌可失去噬菌体的核酸后复愈;4.溶原细菌对同源噬菌体的感染具有免疫性;5.某些溶原细菌可以合成特殊的代谢产物,如白喉杆菌只有在被β–噬菌体感染形成溶原细菌后才能产生白喉毒素;6.温和噬菌体有λ噬菌体与P1噬菌体等。它们都可以感染宿主细胞后形成溶原细菌,两者区别在于:λ噬菌体DNA通常整合到宿主染色体上;P1噬菌体感染宿主后主在游离在细胞质中。第17页,共41页,星期日,2025年,2月5日λ噬菌体在基因工程中的利用λ噬菌体基因有一半左右基因为非必需基因;当它们被外源基因取代之后,不影响噬菌体的生命周期。由外源基因取代非必需基因所形成的重组噬菌体DNA,可以随寄主细胞一起被复制和增殖。常用的λ噬菌体载体类型插入型载体;免疫功能失活插入型载体;β-半乳糖苷酶失活插入型载体。替换型载体;柯斯质粒载体。第18页,共41页,星期日,2025
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