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细菌的基因重组.ppt

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S.typhimurium的P22噬菌体、E.coli的P1噬菌体、Bacillussubtilis的PBS1和SP10等噬菌体都能进行完全普遍转导。供体菌转导媒介——噬菌体受体菌第30页,共70页,星期日,2025年,2月5日(2)流产普遍转导简称流产转导(abortivetransduction)。经转导噬菌体的媒介而获得了供体菌DNA片段的受体菌,外源DNA在其内既不进行交换、整合和复制,也不迅速消失,而仅进行转录、转译和性状表达,这种现象就称流产转导。第31页,共70页,星期日,2025年,2月5日受体菌外源DNA细胞分裂外源基因经转录、转译而形成的少量酶获得外源DNA获得少量酶不断稀释第32页,共70页,星期日,2025年,2月5日特点:在选择培养基平板上形成微小菌落DNA不能复制,因此群体中仅一个细胞含有DNA,而其它细胞只能得到其基因产物,形成微小菌落。第33页,共70页,星期日,2025年,2月5日普遍性转导的三种后果:进入受体的外源DNA通过与细胞染色体的重组交换而形成稳定的转导子。流产转导(abortivetransduction)转导DNA不能进行重组和复制,但其携带的基因可经过转录而得到表达。特点:在选择培养基平板上形成微小菌落外源DNA被降解,转导失败。DNA不能复制,因此群体中仅一个细胞含有DNA,而其它细胞只能得到其基因产物,形成微小菌落。第34页,共70页,星期日,2025年,2月5日2.局限转导(specializedtransduction,restrictedtransduction)指通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中,并与后者的基因组整合、重组,形成转导子的现象。最初于1954年在E.coliK12中发现。第35页,共70页,星期日,2025年,2月5日特点:①只局限于传递供体菌核染色体上的个别特定基因,一般为噬菌体整合位点两侧的基因;②该特定基因由部分缺陷的温和噬菌体携带;③缺陷噬菌体的形成方式是由于它在脱离宿主染色体过程中,发生低频率(~10-5)“误切”(不正常切离,abnormalexcesion)或由于双重溶源菌的裂解而形成;④局限转导噬菌体的产生要通过UV等因素对溶源菌的诱导并引起裂解后才产生。第36页,共70页,星期日,2025年,2月5日局限转导低频转导高频转导根据转导子出现频率的高低分类第37页,共70页,星期日,2025年,2月5日温和噬菌体感染整合到细菌染色体的特定位点上宿主细胞发生溶源化溶源菌因诱导而发生裂解时,在前噬菌体二侧的少数宿主基因因偶尔发生的不正常切割而连在噬菌体DNA上部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因转移到受体菌中第38页,共70页,星期日,2025年,2月5日缺陷噬菌体在宿主细胞内能够象正常的λDNA分子一样进行复制、包装,提供所需要的裂解功能,形成转导颗粒。但没有正常噬菌体的溶源性和增殖能力,感染受体细胞后,通过DNA整合进宿主染色体而形成稳定的转导子。E.coli的λ嗜菌体和φ80嗜菌体具有局限转导的能力。第39页,共70页,星期日,2025年,2月5日比较项目普遍性转导局限性转导转导的基因供体染色体或染色体外的任何基因供体染色体上与原噬菌体紧密连锁的少数几个个别基因噬菌体寄生的位置不结合在寄主染色体特定位置上结合在寄主染色体特定位置上获得转导噬菌体的方法通过敏感菌的裂解或容源菌的诱导紫外线诱导容源菌转导子的区别一般稳定,非溶原性(不表现出任何噬菌体的性状,包括免疫性)一般不稳定,呈缺陷溶原性(对同源噬菌体具有免疫性,但不表现出其它噬菌体的性状)普遍性转导和局限性转导的比较第40页,共70页,星期日,2025年,2月5日受体菌(recipientcell,receptor)直接吸收供体菌(donorcell)的DNA片段而获得后者部分遗传性状的现象,称为转化或转化作用。通过转化方式而形成的杂种后代,称转化子(transformant)。(三)转化(transformation)

1.定义第41页,共70页,星期日,2025年,2月5日原核生物Streptococcuspneumoniae(肺炎链球菌)、Haemophilus(嗜血杆菌属)、Bacillus(芽孢杆菌属)、Neisseria(奈瑟氏球菌属)、Rhizobium(根瘤菌属)、Staphylococcus(葡萄球菌属)、Pseudomonas(假单胞菌属)、Xanthomonas(黄单胞菌属)等。2

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