病毒与亚病毒因子.ppt

Penetration穿入第76页，共143页，星期日，2025年，2月5日BiologicalSynthesis生物合成第77页，共143页，星期日，2025年，2月5日MaturationandRelease成熟和释放第78页，共143页，星期日，2025年，2月5日第79页，共143页，星期日，2025年，2月5日（二）一步生长曲线(onestepgrowthcurve)1.实验设计依据：①1个菌体被1个噬菌体感染,避

免二次吸附(可引起自外裂解)。②细菌群体被噬菌体同步感染。感染复数（m.o.i,mulltiplicityofinfection）：指每一

敏感细胞所能吸附的相应噬菌体的数量。自外裂解（lysisfromwithout）：敏感细胞因超感染

复数的病毒吸附引起的不产生子代病毒的裂解.噬菌体的增殖第80页，共143页，星期日，2025年，2月5日2.实验过程:噬菌体的增殖敏感菌10mlPhage1ml混匀，5min,使之吸附离心或用抗phage血清处理,去除过量phage高倍稀释,吸附phage的菌悬液(避免多次吸附)37℃培养,定时取样第81页，共143页，星期日，2025年，2月5日取样人为裂解处理（每5min）样品中加入氯仿裂解细胞噬菌体的增殖24-48h裂解液加入敏感菌液中适当稀释混合液涂布于琼脂培养基上计数噬菌斑第82页，共143页，星期日，2025年，2月5日3.一步生长曲线(One-StepGrowthCurve):以培养时间为横坐标,以噬菌斑数为纵坐标,绘制成的曲线。经过一步生长实验后,得到的有潜伏期、裂解期的特征性曲线。噬菌体的增殖第83页，共143页，星期日，2025年，2月5日噬菌体的增殖一步生长曲线：潜伏期latentperiod（隐蔽期）(eclipseperiod)裂解期lysisperiod稳定期steadyperiod可分以下阶段：第84页，共143页，星期日，2025年，2月5日病毒一步生长曲线（二）一步生长曲线第85页，共143页，星期日，2025年，2月5日（1）潜伏期：是指病毒侵入宿主细胞到病毒粒子释放出胞外前的一段时间。潜伏前期又称隐蔽期（eclipsephase），是指病毒的核酸侵入宿主细胞后至第一个病毒粒子装配前的一段时间，此时宿主细胞内不含有完整的、有侵染力的成熟病毒粒子。潜伏后期，病毒粒子装配成熟，胞内具侵染性的成熟病毒粒子数目逐渐增加，但没有释放出胞外。寄主细胞的裂解标志着潜伏期的结束。（2）裂解期：是指宿主细胞迅速裂解，溶液中病毒粒子急剧上升的一段时间。病毒没有个体生长，其宿主细胞裂解也是突发的。（3）平台期：是指感染病毒的宿主细胞全部裂解，溶液中病毒效价达到最高点以后的时期。第86页，共143页，星期日，2025年，2月5日两个特征性数据潜伏期：是病毒颗粒吸附于细胞到受染细胞释放出子代病毒颗粒所需的最短时间，不同病毒的潜伏期长短不同，噬菌体以分钟计，动物病毒和植物病毒以小时或天计。裂解量：是每个受染细胞所产生的子代病毒颗粒的平均数目，其值等于潜伏期受染细胞的数目除稳定期受染细胞所释放的全部子代病毒数目，即等于稳定期病毒效价与潜伏期病毒效价之比。通过一步生长曲线测定，噬菌体的裂解量一般为几十到上百个，植物病毒和动物病毒可达数百乃至上万个。第87页，共143页，星期日，2025年，2月5日（三）温和噬菌体与溶原性（lysogeny）某些噬菌体侵染细菌后，将自身基因组整合到细菌细胞染色体上，随寄主细胞分裂而同步复制，并不引起细菌裂解释放噬菌体，因而被称作温和噬菌体（temperatephage）。这种噬菌体与细菌共存的特性称为溶原性（lysogeny），被侵染的细胞被称作溶原性细胞或溶原菌（lysogen），整合到细菌细胞染色体上的病毒被称作前病毒或前噬菌体（prophage）。第88页，共143页，星期日，2025年，2月5日细胞反复分裂溶原途径裂解途径λ噬菌体的裂解和溶原途径诱导第89页，共143页，星期日，2025年，2月5日溶原性特点：（1）溶原性转变（lysogenicconversion）：温和噬菌体在菌体细胞内以前噬菌体形式存在可导致宿主细胞的表型改变，这种改变与其生命周期是否完成没有直接关系，这种改变称为溶原性转变。