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第17讲基因工程和细胞工程
1.(2024•沈阳三模)2024年11月26日,基因编辑婴儿中国诞生。随着这一消息发布,
基因编辑技术争议中走进了人们视线。向导RNA和Cas9蛋白是基因编辑的主要工具。编
辑基因时,基因的上下游各设计一条向导RNA,将其与含有Cas9蛋白编码基因的质粒一
同转入细胞中,向导RNA通过碱基互补配对与靶向目标序列结合,Cas9蛋白使该基因上下
游的DNA双链断裂,对基因进行定点切割。生物体自身会将断裂上下游两端的序列连接起来,
从而实现了细胞中目标基因的敲除。假如此基础上引入一个供体DNA分子,这样细胞就会
断裂部位连入供体DNA片段,从而实现基因的替换或者突变。请回答下列问题:
⑴向导RNA和Cas9蛋白相当于基因工程的工具中的。假如将向导RNA与含有Cas9
蛋白编码基因的质粒一同导入猪的受精卵,可采纳方法。从上述材料可以看诞生物
细胞中还存酶。
(2)假如培育用于器官移植的猪,可用基因编辑技术除去猪受精卵的_______基因,或导入
抑制该基因表达的,培育出没有免疫排斥的移植器官。
(3)将基因编辑的受精卵培育成用于器官移植的猪,首先要将受精卵培育含有无机盐和有
机盐类,而且还要有维生素、、氨基酸、及动物血清等物质的培育液中。
当胚胎发育到期或之前,将其移植到受体内完成胚胎发育。
解析(1)依据题干分析可知:向导RNA和Cas9蛋白是基因编辑的主要工具,Cas9蛋白使
该基因上下游的DNA双链断裂,对基因进行定点切割,故向导RNA和Cas9蛋白相当于基因
工程的工具中的限制酶;将目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射法,故假如将向导
RNA与含有Cas9蛋白编码基因的质粒一同导入猪的受精卵,可采纳显微注射方法。从题述
材料可以看出,生物体自身会将断裂上下游两端的序列连接起来,从而实现细胞中目标基因
的敲除,故生物细胞中还存DNA连接酶。(2)不同生物进行器官移植时存免疫排斥反应,
假如培育用于器官移植的猪,可用基因编辑技术除去猪受精卵的抗原确定基因,或导入抑制
该基因表达的某种调整因子,抑制抗原基因的表达,培育出没有免疫排斥的移植器官。(3)
将基因编辑的受精卵培育成用于器官移植的猪,要经过早期胚胎培育,早期胚胎培育的培育
基要含有有机盐、无机盐、维生素、激素、氨基酸、核苜酸及动物血清等物质。处于囊胚(或
桑柩胚)期的胚胎还没有与母体建立组织上的联系,故当胚胎发育到囊胚(或桑柩胚)期或之
前,将其移植到受体内完成胚胎发育。
答案(1)限制酶显微注射DNA连接
(2)抗原确定某种调整因子
(3)激素核昔酸囊胚(或桑柩胚)
2.(2024-太原二模)请回答下列问题:
(1)氨基酸序列分析技术和DNA序列分析的方法,为基因序列图的绘制供应了可能。DNA合
成仪的问世为、、的获得供应了便利。
(2)探讨人员用大肠杆菌作生产菌,利用基因工程技术分别生产胰岛素两条链。由A、B两条
肽链可推导出A、B基因的碱基序列,依据是
____________________________________________o因为A、B基因中的脱氧核昔酸数量较少,
常用获得目的基因。
⑶检测A、B基因是否导入受体细胞时,常用作探针。检测胰岛素基
因是否表达常用杂交方法。
(4)引导肽是由引导肽基因限制合成的一段多肽序列,若胰岛素的A、B肽链的前端加上引
导肽序列后,可将A、B肽链引导到大肠杆菌的细胞膜外,便于A、B肽链提取。为实现上述
目的,操作是。以后的体外加工过程中,须要用
切除引导肽。
解析(l)DNA合成仪可以用于体外DNA分子小片段的合成,因此为小分子量的DNA的合成、
PCR扩增中引物的合成以及基因工程中基因探针的制作供应了便利。(2)依据胰岛素两条链
上的氨基酸序列,利用氨基酸与密码子的对应关系可以推导出mRNA上的核昔酸序列,进而
依据碱基互补配对的关系推导出合成胰岛素A、B两条肽链的A、B基因的碱基序列。因为A、
B基因中的脱氧核苜酸数量较少,常用人工合成法合成目的基因。(3)检测A、B基因是否导
入受体细胞时,常用放射性同位素标记的目的基因的单链作为探针,与从受体细胞内取出的
核DNA分子的单链进行杂交,
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