DB37T3894 大白菜芜菁花叶病毒、黄瓜花叶病毒检测技术规程.pdfVIP

ICS65.020

B01

DB37

山东省地方标准

DB37/T3894—2020

大白菜芜菁花叶病毒、黄瓜花叶病毒检测技

术规程

Detectionandidentificationofturnipmosaicvirusandcucumbermosaicvirusin

Chinesecabbage

2020-03-31发布2020-05-01实施

山东省市场监督管理局发布

DB37/T3894—2020

前言

本标准按GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由山东省农业农村厅提出并组织实施。

本标准由山东省农业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：山东省农业科学院植物保护研究所。

本标准主要起草人：吴斌、辛相启、王升吉、姜珊珊、张眉、辛志梅。

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DB37/T3894—2020

大白菜芜菁花叶病毒、黄瓜花叶病毒检测技术规程

1范围

本标准规定了大白菜中芜菁花叶病毒、黄瓜花叶病毒的间接ELISA、Dot-ELISA和普通RT-PCR检测方

法。

本标准适用于山东省芜菁花叶病毒、黄瓜花叶病毒在传播介体蚜虫和大白菜中的检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法

3样品采集与保存

3.1蚜虫样品采集

在蚜虫盛发初期进行蚜虫样品采集，于白菜田、周边蔬菜田或田间杂草丛等蚜虫喜好栖息环境，采

用直径33cm的35目纱网在田间随机进行扫扑，分拣装入试剂瓶中，100%乙醇浸泡，-20℃以下冰箱保存

备用。

3.2叶片样品采集

采集表现TuMV和CMV花叶、皱缩、植株矮化、畸形等典型症状的大白菜叶片5g～10g，单株样品袋存

放。样品采集后，在冷藏条件下（2°C～8°C）运送至实验室。如果样品在2天内检测，可暂时储存于2°C～

8°C冷藏箱；如果样品在2天以后检测，保存至-80℃超低温冰箱备用，样品避免反复冻融。

4主要仪器设备、用具和试剂

4.1仪器设备

仪器设备主要有：

a)酶标仪；

b)洗板机；

c)电子天平（感量0.001g）；

d)PCR仪；

e)电泳仪；

f)水平电泳槽；

g)凝胶成像仪；

h)高速冷冻离心机；

i)水浴锅；

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j)样品冷藏柜；

k)低温冰箱（-20°C）；

l)超低温冰箱（-80°C）；

m)磁力搅拌器；

n)高压灭菌锅；

o)可调微量移液器（10μL、100μL、200μL、1000μL）。

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