高考（新高考版）生物热点微练29 PCR技术的应用 .pdfVIP

热点微练29PCR技术的应用

（时间:15分钟）

1.（2021.江西南昌四校联考）2019年6月17日，新华社道了屠呦呦及其团队经过多年攻坚，

在“抗疟机理研究“抗药性成因“调整治疗手段等方面取得新突破。之后屠呦呦团队提

出应对“青蒿素抗药性难题的切实可行的治疗方案。某课题组为得到青蒿素产量高的新品

系，让青蒿素合成过程的某一关键酶基因为s在野生青蒿中过量表达，其过程如图：

提取青蒿素酶1pcr含知S基因的酶2]

总RNA—cDNADNA片段]混合射

酶3

质粒aMJ

重组质粒爽侦青蒿

回答下列问题：

⑴图中酶1是,酶2是o利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中

的模板DNA解链为单链的条件是加热至90〜95°C目的是破坏DNA分子中的键。

在构建重组Ti质粒的过程中，需将目的基因插入Ti质粒的o

（2）检验目的基因是否整合到青蒿基因组，可以将放射性同位素标记的制成基因探

针，与青蒿基因组DNA杂交。理论上，与野生青蒿相比，该探针与转基因青蒿DNA形成

的杂交带的量_______（填“较多”或“较少”）o

（3）据图分析，农杆菌的作用是o为准确判断该课题组的研究目的

是否达到，必须检测转基因青蒿植株中的。

答案（1）逆转录酶限制酶氢T-DNA（2）巾s基因较多（3）感染植物，将目的基因

转移到受体细胞中青蒿素产量

解析（1）据图示可知，酶1促进逆转录的过程，故为逆转录酶，酶2用于切割目的基因和

质粒，故为限制性内切核酸酶（限制酶）。利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的

模板DNA解链为单链的条件是加热至90〜95°C目的是破坏DNA分子中的氢键。构建重

组Ti质粒的过程中，需将目的基因插入Ti质粒的T-DNAO（2）检验目的基因是否整合到青

蒿基因组，可用DNA分子杂交法，即将为s基因制成基因探针，与青蒿基因组DNA杂交。

与野生青蒿相比，该探针与转基因青蒿DNA形成的杂交带的量较多。（3）将目的基因导入植

物细胞常用的方法是农杆菌转化法，由图可知，农杆菌的作用是感染植物，将目的基因转移

到受体细胞中。为准确判断该课题组的研究目的是否达到，必须检测转基因青蒿植株中的青

蒿素产量，若产量增高，则说明达到了目的。

2.（2021.四川大数据统一监测）如图是利用转基因技术生产干扰素的简化流程。回答下列问题:

-DNA分子|9引物

』或,-扩增方向

（复制一次）

I\焉II，二

酵母菌

（1）进行I过程的前提是要根据干扰素基因的设计引物。

⑵I过程需加热至90〜95°C然后冷却至55〜60°C如此操作的目的

是o据图可知，欲获得干扰素基因，至少需要复制

次。

（3）图中A的名称是A上与RNA聚合酶识别和结合的部位称为o

（4）为检测干扰素基因在酵母菌细胞中是否转录，可用

作探针，与从细胞中提取的进行分子杂交。

答案（1）一段核苜酸序列（2）使DNA解链，然后使引物结合到互补DNA链上3（3）重

组质粒启动子（4）放射性同位素、生物素或荧光染料等标记的干扰素（目的）基因mRNA

解析（1）进行PCR的前提条件是要有一段已知目的基因的核昔酸序列，以便合成一对引物，

因此进行I过程的前提是要根据干扰素基因的一段核昔酸序列设计引物。（2）PCR过程中需

加热至90〜95°C目的是使DNA双链解旋，然后冷却至55〜60°C目的是使引物结合到

互补DNA链上。根据PCR复制的特点，结合图示可知，图示中干扰素基因的两条链均应

是第二次复制才能形成的子链，所以至少需要复制三次才能形成图中的干扰素基因。（3）图

中A是干扰素基因和质粒连