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l磷酸基团间的静电斥力?DNA二级结构的多态性Z-DNAZ-DNAA-DNAB-DNAB-DNA右手双股螺旋,细胞内最稳定、最常见的构象A-DNA右手双股螺旋,存在于脱水DNA,DNA-RNA杂交分子Z-DNA左手双股螺旋与基因的表达调控有关三链螺旋结构B-DNA的大沟处,一条DNA链与DNA双螺旋结构中的一条链结合而成;B-DNA与其自身的一条链结合形成分子内三链DNA;B-DNA中与第三链相结合的这条链必需含有一段连续的嘌呤核苷酸序列,为核心链。稳定性较差四链DNAG-四联体(G-quarter)为基本单位,即四个鸟嘌呤在一个正方形平面内以氢键环形连接而成。位于染色体末端,可能起着稳定染色体,参与端粒DNA的复制等功能。某种因素的影响下,正常B-DNA分子双螺旋额外少转或多转几圈,使每圈的碱基对数目大于或小于10,DNA分子双螺旋空间改变,分子内产生额外张力。DNA分子产生扭曲,缓解张力,造成超螺旋结构(supercoil)负向超螺旋、正向超螺旋DNA的超螺旋结构DNA的超螺旋结构(supercoiling)超螺旋结构的生物学意义反映DNA结构的多样性,介导DNA结构的变化,为其功能发挥提供条件;DNA复制、重组,以及基因的表达调控;使DNA形成高度紧密的状态,得以容纳在有效空间。●D.S.DNAS.S.DNA(加温,极端pH,尿素,酰胺)第三节DNA分子变性
(DNAdenaturation)●DNA变性:天然的有规则的双链DNA分子,在被加热或某些试剂的作用下,氢键和碱基间堆积力受到破坏,逐步变为单链线型状态的过程,又称熔解。☆变性过程的表现:S.S.DNA粘度降低DNA热变性过程电子显微镜下的DNA分子的部分变性D.SDNAS.SDNA粘度降低?溶液粘度取决于分子流动过程中的内摩擦和阻力高分子溶液普通溶液线状分子不规则线团球形分子D.S.DNA钢性较强,结构较为舒展的DoublehelixS.S.DNA没有氢键的支撑由螺旋结构向折叠和线团结构转变D.SDNAS.SDNA粘度降低沉降速度加快变性过程的表现S.S.DNA分子的A260nmUV值上升增色效应(Hyperchromicity):指由DNA变性而引起的光吸收值的增加。●影响Tm值的因素1、DNA分子的碱基组成☆GC%含量相同的情况下GC%愈高→Tm值愈大,GC%愈低→Tm值愈小AT形成变性核心,变性加快,Tm值小熔解温度(Tm):50%的DNA双螺旋结构被破坏的温度,一般在85-95℃。2、DNA分子的长度☆大片段D.S.DNA分子之间比较片段长短对Tm值的影响较小,与组成和排列相关☆小于100bp的D.SDNA分子比较片段愈短,变性愈快,Tm值愈小3、变性液中含有尿素,酰胺等尿素,酰胺与碱基间形成氢键改变碱基对间的氢键Tm值可降至40℃左右4、DNA溶液的离子强度(盐浓度的影响)单链DNA主链的磷酸基团负电荷的静电斥力两条单链DNA的分离Na+在磷酸基团周围形成的电子云对静电斥力产生屏蔽作用减弱静电斥力pH~2-301NH2→NH2+(质子化)02改变氢键的形成与结合力03一切减弱氢键、碱基堆积力的因素均将使Tm值降低04酮基→烯醇基pH~12055、pH值(极端pH条件的影响)普通遗传学长江大学普通遗传学长江大学第三章遗传的分子基础本章主要内容一.DNA是主要的遗传物质二.DNA的分子组成与结构三.DNA分子的变性四.DNA分子的复性五.
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