3.2+基因工程的基本操作程序（第1课时）高二生物同步高效课堂（人教版2019选择性必修3）.pptx

第2节基因工程的基本操作程序【本节聚焦】1.基因工程的基本操作程序主要包括哪几个步骤？2.基因工程操作的每一步涉及的技术和方法有哪些？第三章基因工程

从社会中来思考：1.你知道转基因抗虫棉抗虫的机制是什么吗？2.培育转基因抗虫棉一般需要哪些步骤呢？

苏云金杆菌与载体拼接普通棉花（无抗虫特性）棉花细胞抗虫棉提取导入抗虫基因（Bt抗虫蛋白基因）重组DNA分子1.目的基因的筛选与获取2.基因表达载体的构建3.将目的基因导入受体细胞4.目的基因的检测与鉴定(含抗虫基因）（含有并表达抗虫基因）从社会中来

知识拓展：基因的结构基因1基因2基因3DNA片段放大基因通常是有遗传效应的DNA片段；能编码特定的蛋白质非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游能转录相应的mRNA，进一步编码（翻译）出蛋白质的DNA区段不能转录为相应的mRNA，不能编码蛋白质的区段不能转录为相应的mRNA，不能编码蛋白质的区段获取目的基因一般获取哪一部分的DNA片段？基因编码区

知识拓展：基因的结构与RNA聚合酶结合位点RNA聚合酶识别并结合的位点，驱动基因转录出mRNA启动子终止子本质：位置：作用：是一段有特殊序列结构的DNA片段；位于基因上游；也是一段有特殊序列结构的DNA片段；位于基因下游；终止转录本质：位置：作用：启动子终止子非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游原核细胞的基因结构

知识拓展：基因的结构编码区非编码区非编码区内含子外显子启动子终止子外显子：内含子：能转录相应的mRNA，进一步能编码蛋白质的DNA序列。能转录相应的mRNA，但却不能编码蛋白质的DNA序列，然后在翻译前就被剪切掉。真核细胞的基因结构

知识拓展：基因的结构【总结】原核细胞与真核细胞的基因结构比较不能编码蛋白质的序列=非编码区原核生物的基因：不能编码蛋白质的序列真核生物的基因：=非编码区+内含子原核细胞真核细胞不同点编码区是的编码区是间隔的、的相同点都由能够编码蛋白质的和具有调控作用的区组成的连续不连续编码区非编码

一、目的基因的筛选与获取(1)概念：在基因工程的设计和操作中，用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因。(2)实例：与生物抗逆性、优良品质、生产药物、毒物降解和工业用酶等相关的基因。主要指的是编码蛋白质的基因，也可以是一些具有调控作用的因子。1.目的基因资料：苏云金杆菌通过产生苏云金杆菌伴胞晶体蛋白（Bt抗虫蛋白），破坏鳞翅目昆虫的消化系统来杀死棉铃虫。科学家将“杀虫基因”转入棉花中，棉花产生Bt抗虫蛋白抵抗虫害。目的基因那么，如何筛选目的基因呢？

一、目的基因的筛选与获取2.目的基因的筛选：苏云金杆菌制成杀虫剂掌握目的基因的功能掌握目的基因的结构防治棉花害虫发现杀虫作用与Bt基因有关掌握Bt基因的序列深入了解Bt基因的表达产物(Bt抗虫蛋白)如何掌握？抗虫原理？当Bt抗虫蛋白被分解为多肽后，多肽与害虫肠上皮细胞的特异性受体结合，导致细胞膜穿孔，最后造成害虫死亡。思考：Bt抗虫蛋白会不会对人畜产生危害？Bt抗虫蛋白只有在某类昆虫肠道的碱性环境中才能表现出毒性，而人和牲畜的胃液呈酸性，肠道细胞也没有特异性受体。Bt基因是培育转基因抗虫棉较为合适的目的基因怎么获得？

一、目的基因的筛选与获取测序技术序列数据库序列比对工具利用测序技术、序列数据库（如GenBank）、序列对比工具（如BLAST）等，找到合适的目的基因DNA测序仪核苷酸序列比对氨基酸序列比对美国国家生物信息中心测定核酸和蛋白质序列以碱基顺序或氨基酸残基顺序为基本内容的分子生物信息数据库把感兴趣的序列跟已经存在的序列数据库进行比较的工具。通过比对识别相关的序列，从而能获得目的基因和蛋白质的功能。拓展：掌握基因结构和功能的技术方法

一、目的基因的筛选与获取利用PCR获取和扩增目的基因从基因文库中获取从生物组织中直接获取人工合成前提：方法：DNA合成仪基因比较小、核苷酸序列已知通过DNA合成仪用化学方法直接合成（常用）3.获取目的基因常用的方法

先对目的基因进行扩增获取一个Bt基因之后，是否就该立即开始准备转基因操作？抗虫基因快速获得大量抗虫基因苏云金杆菌提取

一、目的基因的筛选与获取4.利用PCR获取和扩增目的基因PCR是的缩写。它是一项根据＿＿＿＿＿的原理，在提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对的技术。（1）PCR的概念：中文全称原理