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(五)信号指示系统它的作用是放大信号并以适当方式指示或记录下来。常用的信号指示装置有直读检流计、电位调节指零装置以及数字显示或自动记录装置等。很多型号的分光光度计装配有微处理机,一方面可对分光光度计进行操作控制,另一方面可进行数据处理。第59页,共115页,星期日,2025年,2月5日二、紫外-可见分光光度计的类型紫外-可见分光光度计的类型很多,但可归纳为三种类型,即单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。1,单光束分光光度计经单色器分光后的一束平行光,轮流通过参比溶液和样品溶液,以进行吸光度的测定。这种简易型分光光度计结构简单,操作方便,维修容易,适用于常规分析。第60页,共115页,星期日,2025年,2月5日单波长单光束分光光度计0.575光源单色器吸收池检测器显示第61页,共115页,星期日,2025年,2月5日单光束光路示意图第62页,共115页,星期日,2025年,2月5日2,双光束分光光度计经单色器分光后经反射镜分解为强度相等的两束光,一束通过参比池,一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度,此比值即为试样的透射比,经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和样品池,还能自动消除光源强度变化所引起的误差。第63页,共115页,星期日,2025年,2月5日单波长双光束分光光度计参比池差值ΔA光源单色器吸收池检测器显示光束分裂器第64页,共115页,星期日,2025年,2月5日3,双波长分光光度计由同一光源发出的光被分成两束,分别经过两个单色器,得到两束不同波长(?1和?2)的单色光,利用切光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸收池第65页,共115页,星期日,2025年,2月5日?1为选好的测定波长,一般为待测物质的?max?2为选好的参比波长,一般为待测物质的?min测得的是样品在两种波长?1和?2处的吸光度之差?A,?A为扣除了背景吸收的吸光度?A=A?1-A?2=(K?1-K?2)CL优点:(1)大大提高了测定准确度,可完全扣除背景(2)可用于微量组分的测定(3)可用于混浊液和多组分混合物的定量测定第66页,共115页,星期日,2025年,2月5日光闸单色器斩波器参比光电倍增管图单光束分光光度计原理图光电倍增管斩波器光闸试样单色器图双光束分光光度计原理图第67页,共115页,星期日,2025年,2月5日第68页,共115页,星期日,2025年,2月5日第69页,共115页,星期日,2025年,2月5日4分区切光器4扇区切光器CSSC*(*ChopperSegmentSignalCorrection)保证了波长精度达到+/-0.08nm,同时保证了在读取数据的瞬时光栅的稳定性第70页,共115页,星期日,2025年,2月5日§3-4紫外可见吸收光谱法的应用不同的有机化合物具有不同的吸收光谱,可进行简单的定性分析,但吸收光谱较简单,只能用于鉴定共轭发色团,推断未知物骨架,可进行定量分析及测定配合物配位比和稳定常数一、定性分析:(一)比较吸收光谱法根据化合物吸收光谱的形状、吸收峰的数目、强度、位置进行定性分析待测样品相同条件样品谱标准物质标准谱第71页,共115页,星期日,2025年,2月5日(二)计算?max的经验规律用经验规则计算不饱和有机化合物的?max并与实测值进行比较,然后确认物质的结构。常用的规则是WoodWard(伍德瓦特)规则,可计算共轭多烯及α,β—不饱和醛酮化合物。第72页,共115页,星期日,2025年,2月5日1.共轭多烯的λmax计算链状共轭二烯单环共轭二烯异环共轭二烯同环共轭二烯λmax217nm217nm214nm253nm骨架母体第73页,共115页,星期日,2025年,2月5日增加值:延伸一个共轭双键+30nm
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