蛋白质的生物合成课件.pptVIP

真核生物肽鏈合成的延長過程與原核基本相似，但有不同的反應體系和延長因數。另外，真核細胞核蛋白體沒有E位，轉位時卸載的tRNA直接從P位脫落。（四）真核生物延長過程三、肽鏈合成的終止當mRNA上終止密碼出現後，多肽鏈合成停止，肽鏈從肽醯-tRNA中釋出，mRNA、核蛋白體等分離，這些過程稱為肽鏈合成終止。UAG53RFCOO-終止相關的蛋白因數稱為釋放因數(releasefactor,RF)一是識別終止密碼，如RF-1特異識別UAA、UAG；而RF-2可識別UAA、UGA。二是誘導轉肽酶改變為酯酶活性，相當於催化肽醯基轉移到水分子-OH上，使肽鏈從核蛋白體上釋放。釋放因數的功能原核生物釋放因數：RF-1，RF-2，RF-3真核生物釋放因數：eRF原核肽鏈合成終止過程核蛋白體沿mRNA鏈滑動，不斷使多肽鏈延長，直到終止信號進入受位。1．識別：RF識別終止密碼，進入核蛋白體的A位。?2．水解：RF使轉肽酶變為酯酶活性，多肽鏈與tRNA之間的酯鍵被水解，多肽鏈釋放。?3．解離：通過水解GTP，使核蛋白體與mRNA分離，tRNA、RF脫落，核蛋白體解離為大、小亞基。多聚核蛋白體(polysome)——使蛋白質合成高速、高效進行。電鏡下的多聚核蛋白體現象蛋白質合成後加工和輸送PosttranslationalProcessingProteinTransportation第三節從核蛋白體釋放出的新生多肽鏈不具備蛋白質生物活性，必需經過不同的翻譯後複雜加工過程才轉變為天然構象的功能蛋白。主要包括多肽鏈折疊為天然的三維結構肽鏈一級結構的修飾高級結構修飾一、多肽鏈折疊為天然功能構象的蛋白質新生肽鏈的折疊在肽鏈合成中、合成後完成，新生肽鏈N端在核蛋白體上一出現，肽鏈的折疊即開始。可能隨著序列的不斷延伸肽鏈逐步折疊，產生正確的二級結構、模序、結構域到形成完整空間構象。一般認為，多肽鏈自身氨基酸順序儲存著蛋白質折疊的資訊，即一級結構是空間構象的基礎。細胞中大多數天然蛋白質折疊都不是自動完成，而需要其他酶、蛋白輔助。幾種有促進蛋白折疊功能的大分子1.分子伴侶(molecularchaperon)2.蛋白二硫鍵異構酶(proteindisulfideisomerase,PDI)3.肽-脯氨醯順反異構酶(peptideprolylcis-transisomerase,PPI)1.熱休克蛋白(heatshockprotein,HSP)HSP70、HSP40和GreE族2.伴侶素(chaperonins)GroEL和GroES家族分子伴侶molecularchaperon分子伴侶是細胞一類保守蛋白質，可識別肽鏈的非天然構象，促進各功能域和整體蛋白質的正確折疊。熱休克蛋白促進蛋白質折疊的基本作用——結合保護待折疊多肽片段，再釋放該片段進行折疊。形成HSP70和多肽片段依次結合、解離的迴圈。HSP40結合待折疊多肽片段HSP70-ATP複合物HSP40-HSP70-ADP-多肽複合物ATP水解GrpEATPADP複合物解離，釋出多肽鏈片段進行正確折疊原核生物翻譯過程中核蛋白體結構模式:A位：氨基醯位(aminoacylsite)P位：肽醯位(peptidylsite)E位：排出位(exitsite)三、tRNA與氨基酸的活化反密碼環氨基酸臂tRNA的三級結構示意圖氨基酸+tRNA氨基醯-tRNAATPAMP＋PPi氨基醯-tRNA合成酶（一）氨基醯-tRNA合成酶(aminoacyl-tRNAsynthetase)氨基酸的活化兩步反應氨基酸＋ATP-E—→氨基醯-AMP-E＋AMP＋PPi氨基醯-AMP-E＋tRNA—→氨基醯-tRNA＋AMP＋E在此反應中，特異的tRNA3’端CCA上的2’或3’位自由羥基與相應的活化氨基酸以酯鍵相連接，形成氨基酸tRNA，從而使活化氨基酸能夠被搬運至核蛋白體上參與多肽鏈的合成。氨基酸tRNA的合成，可使氨基酸①活化；②搬運；③定位。氨基醯-tRNA合成酶對底物氨基酸和tRNA都有高度特異性，這是保證tRNA能夠攜帶正確的氨基酸對號入座的必要條件。。氨基醯-tRNA合成酶具有校正活性。目前認為，該酶對tRNA的識別，是因為在tRNA的氨基酸臂上存在特定的識別密碼，即第二套遺傳密碼。氨基醯-tRNA的表示方法：Ala-tRNAAlaSer-tR