药物生殖和发育毒性作用.ppt

3、致畸作用机理Wilsom(1977)提出了畸形发生的9种机制，包括突变、染色体断裂、有丝分裂改变、改变核酸完整性或功能、减少前体或底物的补给、减少能源支持、改变膜特性、渗透压不平衡和酶抑制作用。近年来在分子水平的研究有很大的进展，虽然胚胎有代偿机制弥补外源性化学物的影响，但是，是否产生畸形依赖于在致病过程中的每个步骤在损伤和修复之间的平衡。第29页，共52页，星期日，2025年，2月5日干扰基因表达基因突变与染色体畸变损伤细胞和分子水平的翻译细胞调亡干扰细胞通过胎盘毒性引起发育毒性干扰母体稳态内分泌干扰作用第30页，共52页，星期日，2025年，2月5日4、外源化学物发育毒性的评价传统常规致畸试验动物选择剂量分组动物交配处理胎仔检查第31页，共52页，星期日，2025年，2月5日动物选择:致畸试验的动物选择，除参照毒性试验中选择动物的一般原则，即食性和对受试物代谢过程与人类接近，体型小，驯服，容易饲养和繁殖及价廉外，还应特别注意妊娠过程较短、每窝产仔数较多和胎盘构造及厚度与人类接近等特点。第32页，共52页，星期日，2025年，2月5日剂量分组一般应先进行预试，目的是找出引起母体中毒的剂量。最少设3个剂量组，另设对照组。原则上最高剂量组，可以引起母体轻度中毒，即进食量减少、体重减轻、死亡不超过10%。最低剂量组不应观察到任何中毒症状；中间剂量组可以允许母体出现某些极轻微中毒症状。其剂量与高剂量和低剂量成等比级数关系。一般最高剂量不超过LD50的1/5～1/3，低剂量可为1／100～1／30。第33页，共52页，星期日，2025年，2月5日动物交配处理每组动物大鼠或小鼠为12～20只，家兔8～12只，狗等大动物3～4只。将性成熟雌雄动物按雌雄l：1或2：1比例同笼交配。每日将已确定受孕雌鼠随机分入各剂量组和对照组。出现阴栓或精子之日即为受孕0日，也有人作为第1日由于致畸作用有极为明确的敏感期，应精确掌握动物接触受试物的时间，必须在器官发生期。第34页，共52页，星期日，2025年，2月5日胎仔检查自然分娩前1-2日将受孕动物处死，剖腹取出子宫及活产胎仔，并另行记录死胎及吸收胎。一般大鼠在受孕后第19-20天，小鼠第18-19天，家兔在第29天。第35页，共52页，星期日，2025年，2月5日下列几方面进行畸形检查：外观畸形肉眼检查，例如露脑；肉眼检查内脏及软组织畸形，例如腭裂；骨骼畸形检查，例如颅顶骨缺损，分叉肋等。畸形检查只限活产胎仔。第36页，共52页，星期日，2025年，2月5日结果评定活产幼仔平均畸形出现数:即根据出现的畸形总数，计算每个活产幼仔出现的畸形平均数。畸形出现率:即作为畸胎的幼仔在活产幼仔总数中所占的百分率。母体畸胎出现率:即出现畸形胎仔的母体在妊娠母体总数中所占的百分率。第37页，共52页，星期日，2025年，2月5日确定受试物是否具有致畸作用时需注意以下几点：任何结果必须通过统计计算方法进行剂量组与对照组对比；必须具有统计学意义才能认为是阳性结果。应该掌握所用实验动物品系的自然畸形发生率。致畸作用中动物物种和品系差异较为显著，因此要求在两种动物进行试验。由于物种差异，对动物不具有致畸作用的外源化学物对人是否致畸的问题，应格外认真对待。第38页，共52页，星期日，2025年，2月5日发育毒性的替代试验大鼠全胚胎培养胚胎细胞微团培养小鼠胚胎干细胞试验发育毒性的体内预筛试验(C.K.试验)第39页，共52页，星期日，2025年，2月5日5、致发育毒性药物5.1组织形成受阻-沙立度胺第40页，共52页，星期日，2025年，2月5日5.2胎儿乙内酰脲综合症-抗癫痫药苯妥英、丙戊酸钠等颅面骨异常发育特征四肢改变生长学习改变第41页，共52页，星期日，2025年，2月5日5.3与致癌相关的致畸剂-己烯雌酚生殖系统癌症4、烟碱5、中草药6、其它人类致畸剂：四环素族、甲氨蝶呤；白消安、环磷酰胺第42页，共52页，星期日，2025年，2月5日小结一、常用术语1、胚胎毒性2、致畸性3、致畸剂4、母体毒性5、至畸指数二、男性生殖毒理学1、精子易感性