不同重金属胁迫下聚合草内生菌多样性与筛选验证.pdf

摘要

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随着工业生产的进步，对有毒重金属污染的关注度不断增加。植物微生物联-

合修复被认为是成本效益高、环境友好的方法。因此，为了更好地探究植物微生

物修复实质，选用对重金属具有一定富集作用的聚合草作为研究材料。

重金属胁迫使聚合草、小麦生长受到抑制，从不同重金属胁迫下的聚合草中

分离得到的内生菌，接种至宿主植物聚合草以及非宿主植物小麦体内，可有效提

高植物抗逆性。聚合草生物量大，适应能力强，可同时富集多种重金属，为植物

微生物修复的理想材料。

本研究采用盆栽实验模拟土壤重金属污染，研究从受胁迫的宿主植物中分离

得到的内生菌，再次回接到植物中与不接种植物之间的差异，揭示聚合草内生细

PbZnCd

菌在宿主植物和被接种植物中对、、的缓解效果。实验选用聚合草根部进

行繁殖，设置三种重金属处理（Pb、Zn、Cd）胁迫处理，胁迫浓度为Pb：200mg/kg、

Zn2000mg/kgCd100mg/kg

：、：。从聚合草根部取样测序，了解不同重金属胁迫

下聚合草内生微生物的群落结构和多样性。并对聚合草根部内生细菌进行分离纯

化，筛选出既具有促生作用又对重金属有一定抗性的内生菌，将其回接到宿主植

物聚合草以及非宿主植物小麦中，验证其对回接植物的重金属缓解作用。了解微

生物对重金属危害植物的影响，以期为重金属微生物修复提供一定的参考。本研

究取得结果如下：

1ZnCdPb

（）高通量测序结果显示聚合草内生细菌的多样性表现为：＞＞＞

CKCKPbZnCd

；内生真菌的多样性表现为：＞＞＞，内生细菌和内生真菌相互比

较，内生细菌的群落结构更丰富，内生真菌较少。共现性网络表示：与对照组相

比，在宿主植物受到重金属胁迫后细菌间的相互作用关系更加紧密，节点数、模

块化程度均增加。对于内生真菌而言，随着外源重金属的添加，真菌群落间的相

互作用关系与节点数明显减少。结果表明，在宿主植物受到非生物胁迫时，细菌

表现出更积极的响应，通过增加菌落多样性与群落结构丰富度来协助宿主植物抵

御外界不利环境；而内生真菌在宿主植物受到迫害时韧性较差。故后期分离筛选、

回接验证均选用聚合草内生细菌为主要研究对象。

2

（）用于内生菌分离的聚合草植株先进行重金属胁迫处理，从聚合草根部得

I

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到一株既具有良好的促生活性又对三种重金属具有较强的耐受性的菌株，命名为

Zn-G-5。通过16SrDNA分析、形态学对比以及分子鉴定该菌株为芽孢杆菌

（Bacillus）。Zn-G-5相比其他菌株表现出对Pb、Zn、Cd三种重金属均具有较高的

抗性。实验结果显示，菌株Zn-G-5不但表现出对重金属的耐受性，并且具有促进

植物生长的潜力。因此，我们将菌株Zn-G-5作为下一步实验的对象。

（3）重金属的胁迫对聚合草和小麦造成不同程度的抑制作用，主要体现在植

株高度、鲜重以及干重方面的降低。随着重金属的施加聚合草、小麦生物量也相

应减少，但在接菌处理之后，聚合草以及小麦的株高、鲜重、干重呈现增加趋势。

重金属胁迫使聚合草、小麦抗氧化酶活性显著下降，表明重金属胁迫对植物体抗

氧化酶系统造成破坏，导致叶片过度损伤。但加菌处理之后，聚合草和小麦在Pb、

ZnCdSODPODCATAPX

、胁迫下的、、和酶活性显著升高。表明接种菌株后，

Zn-G-5能与宿主植物和谐共生并且可以缓解重金属为植物所带来的氧化压力，修

复植株抗氧化酶系统，提高了宿主植物的抗氧化能力、恢复了植株抗氧化酶活性。

4PbZnCdZn-G-5

（）在重金属、、胁迫下，接种