实验九人体X-染色质的观察.pptVIP

*在女性间期细胞核内侧靠近核膜处有约1微米大小的反光极强的颗粒状亮点，即为巴氏小体。实验九

人类X染色质的观察哈尔滨师范大学生命科学与技术学院遗传学教研室2010年3月2识别X染色质的形态特征及所在部位。1掌握观察与鉴别X染色质的简易方法；一、实验目的11949年等研究发现：雌猫神经元细胞间期核内——凝缩的深染小体。2进一步发现：其它雌性哺乳动物（包括人类）也同样有这种结构。3而且在其它细胞的间期核中也可以见到这一结构，称之为Barr小体（巴氏小体）。4研究表明，巴氏小体是X染色体异固缩的结果，也称为X染色质或X小体，在细胞周期中比有活性的X染色体复制稍晚。X-染色质的发现二、实验原理2.莱昂氏假说(Lyonhypothesis)1961年提出：正常雌性哺乳动物体细胞中的两条X染色体之一在遗传性状表达上是失活的；在同一个体的不同细胞中，X染色体失活是随机而恒定的；失活现象发生在胚胎发育的早期。030102由于雌性体细胞中的两个X染色体中的一个发生异固缩（也称为Lyon化现象），失去活性，这样保证了雌雄两性体细胞中都只有一条X染色体保持转录活性，使两性X连锁基因产物的量保持在相同水平上，这种效应称为X染色体的剂量补偿。Barr小体的数目＝X染色体数目－1剂量补偿效应

(dosagecompensation)4.莱昂氏假说的修正（新莱昂氏假说）030201提出：1967年，美国的遗传学家Ohno提出45，X≠46，XX；47XXY≠46，XY，这两个不等式是否成立的疑问。按照莱昂假说应该是两者完全相同，但45，X与47，XXY实际是两种综合症。修正：1974年，失活的X染色体上并非全部基因都呈莱昂化失活。X染色质检查广泛应用于临床，作为性别鉴定和性染色体异常的一种辅助诊断方法。例如：克氏综合症（XXY）、特纳氏综合征（XO）、其它性染色体异常的患者如XXX，XXYY等。X染色质检查的应用0102011材料：女性口腔黏膜细胞、发根细胞。3牙签等。2器具：显微镜、载玻片、盖玻片、无菌4药品：60%醋酸、45%的醋酸、5石炭酸品红。三、实验材料、器具和药品010203040506口腔黏膜细胞X染色质（Barr小体）显示方法取材：漱口3~4次后，用无菌牙签从面颊部内侧刮取口腔黏膜细胞，第一次的刮取物弃去，在原位重复刮2~3下，涂在载玻片上；固定：加一滴60%醋酸固定5min，用滤纸吸去多余醋酸；染色：加一滴石炭酸品红染色2min；制片：盖上盖片，垫上滤纸用拇指压片；镜检：低倍→高倍。四、实验方法发根毛囊细胞的X染色质（Barr小体）显示方法01取材：拔取女性带毛囊细胞的头发，置于载玻片上；02固定：在毛囊上滴加一滴45%的醋酸（或5mol/L盐酸）03固定5min，吸掉多余的醋酸；04染色：用镊子将软化的毛囊剥下，加一滴石炭酸品红05染色2~3min；06制片：盖上盖片，垫上滤纸用拇指压片；07镜检：低倍→高倍。08X染色质的辨别：五、观察结果低倍镜下检出典型的可数细胞，标准是：核质呈网状或细颗粒状分布核膜清晰，核无缺损染色适度周围无杂菌在高倍镜下进一步观察。X染色质是一结构致密的浓染小体，轮廓清楚，大小1~1.5μm；形态：微凸形、三角形、卵形、短棒形等，常附于核膜边缘或靠近内侧。（2）高倍镜下观察X染色质的形态特征及所在部位：X染色质*在女性间期细胞核内侧靠近核膜处有约1微米大小的反光极强的颗粒状亮点，即为巴氏小体。