利用PCR技术扩增目的基因表述题.docxVIP

利用PCR技术扩增目的基因表述题

选择题

1.PCR技术扩增目的基因的过程中，不需要的条件是（）

A.模板DNA

B.四种核糖核苷酸

C.耐热性DNA聚合酶

D.引物

答案：B。在PCR技术中，是以DNA为模板进行扩增，需要的原料是四种脱氧核糖核苷酸，而不是四种核糖核苷酸。模板DNA是扩增的基础，耐热性DNA聚合酶用于催化脱氧核苷酸的聚合，引物能引导DNA聚合酶从其3端开始合成新的DNA链。

2.PCR技术中，引物的作用是（）

A.打开DNA双链

B.催化合成DNA子链

C.使DNA聚合酶能够从引物的3端开始延伸DNA链

D.提供模板

答案：C。PCR过程中，高温可以使DNA双链打开，A错误；催化合成DNA子链的是DNA聚合酶，B错误；引物能与模板链结合，使DNA聚合酶能够从引物的3端开始延伸DNA链，C正确；模板是原来的DNA分子，而不是引物，D错误。

3.PCR一般要经过三十多次循环，从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时将（）

A.仍与引物Ⅰ结合进行DNA子链的延伸

B.与引物Ⅱ结合进行DNA子链的延伸

C.同时与引物Ⅰ和引物Ⅱ结合进行子链的延伸

D.无需与引物结合，在酶的作用下从头合成子链

答案：B。从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时，其互补链的一端是引物Ⅱ结合的位点，所以会与引物Ⅱ结合进行DNA子链的延伸，B正确。

填空题

1.PCR技术的中文名称是______，其原理是______。

答案：多聚酶链式反应；DNA双链复制。PCR即多聚酶链式反应，它是一种在体外快速扩增特定DNA片段的技术，其原理和细胞内DNA复制一样，都是DNA双链复制。

2.PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的______，以便根据这一序列合成______。

答案：核苷酸序列；引物。只有知道目的基因的核苷酸序列，才能根据该序列合成与之互补的引物，从而引导DNA聚合酶对目的基因进行扩增。

3.PCR反应过程中包括三个重要步骤，分别是______、______、______。

答案：变性；复性；延伸。变性是指在高温下使DNA双链解开；复性是指温度降低，引物与模板DNA单链结合；延伸是指在DNA聚合酶的作用下，以脱氧核苷酸为原料，从引物的3端开始合成新的DNA链。

判断题

1.PCR技术扩增目的基因时，必须加入解旋酶才能使DNA双链打开。（）

答案：错误。PCR技术中是通过高温（一般9095℃）使DNA双链打开，不需要加入解旋酶。

2.PCR技术扩增目的基因过程中，子链的合成方向是从5端到3端。（）

答案：正确。无论是细胞内的DNA复制还是PCR技术中DNA的扩增，子链的合成方向都是从5端到3端。

3.PCR技术扩增目的基因时，需要的原料是四种核糖核苷酸。（）

答案：错误。PCR技术是扩增DNA，需要的原料是四种脱氧核糖核苷酸，而不是核糖核苷酸。

解答题

1.简述PCR技术扩增目的基因的具体过程。

答案：PCR技术扩增目的基因的过程主要包括以下三步：

变性：将反应体系加热至9095℃，使DNA双链解开，形成单链DNA，作为DNA复制的模板。

复性：将温度降低至5560℃，引物与模板DNA单链的互补序列结合。

延伸：将温度升高至7075℃，在耐热性DNA聚合酶的作用下，以四种脱氧核糖核苷酸为原料，从引物的3端开始，按照碱基互补配对原则合成新的DNA链。

重复以上变性、复性、延伸的过程，经过多次循环后，目的基因的数量呈指数形式增长。

2.与传统的基因克隆方法相比，PCR技术扩增目的基因有哪些优点？

答案：与传统的基因克隆方法相比，PCR技术扩增目的基因具有以下优点：

特异性强：PCR技术通过设计特异性的引物，可以准确地扩增目的基因，避免了非目的基因的干扰。

灵敏度高：PCR技术可以从极少量的DNA模板中扩增出大量的目的基因，即使样品中目的基因的含量很低，也能有效地进行扩增。

快速高效：PCR技术的反应过程可以在短时间内完成，一般经过3040次循环，就可以在数小时内将目的基因扩增数百万倍。

操作简便：PCR技术不需要复杂的实验设备和技术，只需要将模板DNA、引物、dNTP、DNA聚合酶等加入到反应体系中，设置好反应条件，就可以自动完成扩增过程。

3.在PCR技术扩增目的基因的过程中，影响扩增效果的因素有哪些？

答案：在PCR技术扩增目的基因的过程中，影响扩增效果的因素主要有以下几个方面：

模板DNA：模板DNA的质量和浓度会影响扩增效果。模板DNA应尽量纯净，避免杂质的污