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MALDI-TOF的样品制备
¾样品制备
¾基质选择
¾样品净化
样品制备的一般顺序：
选择基质
制备基质溶液
制备样品溶液
混匀基质和样品
点靶
放干
理想的样品浓度
样品类型理想浓度
0.1-10pmol/µl
多肽和蛋白质
(糖蛋白10pmol/µl)
核酸10-100pmol/µl
多聚物100pmol/µl
注:1pmol/ul=10-6M
常见的样品制备方法
干燥液滴法
真空干燥法
压碎结晶法
快速蒸发法
双层法
夹心法
电喷雾法
快速点样法
预点基质法
先点样品法
压片法
干燥液滴法
操作步骤：
在适当的溶剂中配制新鲜的饱和基质溶液
离心,吸5-10uL基质溶液上清,加到小离心管中
加入1-2uL样品溶液(1-100mM)，涡旋混匀
吸0.5-2uL点靶
室温自然干燥
本法最为常用，适用于大多数情况。
干燥液滴法的优缺点
优点
1.方法简单，适用于很多种样品
2.具有较好的耐盐性
3.适用于混合物
4.可以洗去表面的不挥发性盐份
缺点
1.使用某些基质（如2,5-dihydroxybenzoicacid）时，
结晶不均匀，容易长在液滴的外环边上。
2.有些组份与基质不能形成共结晶。
真空干燥法
操作步骤：
•在适当的溶剂中配制新鲜的饱和基质溶液
•离心,吸取5-10uL基质溶液上清,加到小离心管中
•加入1-2uL样品溶液(1-100mM)，涡旋混匀
•吸取0.5-2uL点靶
•把靶放入真空干燥器内，抽真空到10-2Torr以下，使溶液快
速干燥
注：本法是干燥液滴法的一种变体。
真空干燥
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