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NK细胞培养技术之纯因子培养.pdf

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NK细胞培养

纯因子培养

NK细胞培养,特别是纯因子形式的NK细胞培养,普遍认为比较难。不是细胞数上不去,就

是阳性率上不去。友康生物作为中国细胞治疗领域的无血清培养领先企业。持续多年NK细

胞培养的理论研究及实践应用。在NK细胞的培养方面,有的成果已经完全达到了让人难以

相信的程度。

第一,血液中提取的单个核细胞在接种入细胞培养瓶后的5分钟以内,我们就大致可以知

道这个样本大致的细胞数的范围,大致的CD3-CD56+阳性率的范围。

听起来是在吹牛,实际并非如此。不同的样本确实千差万别,但大致可以分为2类。每一类

都有其大致相同的生长特点与生长轨迹。友康生物在长期的研究与实践中已经掌握了NK细

胞培养的规律,所以可以达到“吾亦无他,唯手熟尔”。

第二,细胞数量可以稳定达到40-60亿/2L培养体系,阳性率在60%-85%的阳性率的区间。

有人讲,每个人体都是一个个体,每个细胞样本都是独一无二的。这个判断非常正确。如何

让NK的培养体系能够适合至少90%以上的样本,确实是个很大的挑战。我们非常自豪的讲,

我们经受住了这个挑战。

在NK细胞培养时,能够把细胞数养到40-60亿/2L,不困难。能够把阳性率控制在60%-85%

之间,也不困难。但要同时达到这两个目标,极度困难。因为通常有一个认识,那就是NK

的细胞数与阳性率就好像一个跷跷板的两端。一端上去了,一端就会下去。

问题的解决需要有理论的突破及创新方法的使用。令人自豪的是,我们实现了理论的突破,

进而实现了应用方法的创新。

第三,整个培养体系仅需消耗一瓶一袋,成本更低,无菌保障水平更高。

友康生物的培养体系,是面向生产级的培养体系。因此,控制除了培养基本身以外的成本,

是这个培养体系设计的重要考虑因素。在整个培养过程中,用户只需消耗一个T175的培养

瓶以及一个2L的培养袋。是的,仅需要一个培养瓶与一个培养袋。

实际上,减少耗材消耗的目的一方面是为了降低生产成本,另一方面也是更重要的一个方面

是,为了降低污染发生的概率。在无菌培养的过程中,每少一步操作,就会减少一个可能污

染的机会。更多的培养瓶,更多的培养袋,意味着更多的污染可能性。

第四,培养过程“傻瓜式”:操作步骤少,操作要求低,人员成本低。

对大规模生产NK细胞的企业而言,复杂的、精细的操作要求绝对是个噩梦。因为,这意味

着操作人需要有更高的技能,而这又意味着企业需要付出跟高的人力成本;更复杂,更精细

的操作要求,也意味着更多的犯错误的可能性。从原理上讲,若要减少犯错的可能性,最靠

谱的解决办法是减少会导致犯错的操作,即减少操作步骤。

在友康生物的整个14天的培养全过程中,用户仅需操作5次,细胞计数2次。并且在用户

能够熟练操作后,可以达到全程均无需细胞计数即可有令人满意的结果。

第五,培养瓶不需预包被,真正做到了样本“即来即用,不需等待”。

目前的很多NK细胞纯因子培养方面,均需要提前一个晚上包被细胞培养瓶。一方面增加了

成本,包被培养瓶的胶原等细胞因子价格不菲;另一方面,不可能做到样本即来即用。因为

很多情况下用户也不清楚样本什么时间到。经常会出现本来是新鲜采集的样本,只好放置在

2-8度冰箱中过夜后使用,生生的把新鲜样本用成了冷藏样本。培养的效果大打折扣也一点

不奇怪了。

第六,培养体系可以适应多种不同类型的样本。

友康生物的NK培养体系,除了可以应用于最常见的新鲜采集的外周血,也可以使用冷

藏的浓缩白细胞,还可以使用经过-197度液氮冻存的单个核细胞。给用户提供了多个选择。

毕竟,用户的样本多样。

友康恒业生物科技(北京)有限公司

渠道部

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