PBS缓冲液的配制方法.pdf

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PBS缓冲液配方

管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面是

我们实验室的配方，供大家参考。

我们实验室的配方：

A液：0.1mol/L磷酸二氢钾：

磷酸二氢钾（KH2PO4，MW136.09）1.361g，加双蒸水至100ml。

B液：0.1mol/L磷酸氢二钠：

酸酸氢二钠（Na2HPO4.2H2O，MW177.99）1.78g，加双蒸水至100ml。

或者酸酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O，MW358.14）3.58g，加双蒸水至

100ml。

pH－－A液（ml）－－B液（ml）

5.60－－9.50－－0.25

5.91－－9.00－－1.00

6.24－－8.00－－2.00

6.47－－7.00－－3.00

6.64－－6.00－－4.00

6.81－－5.00－－5.00

6.98－－4.00－－6.00

7.17－－3.00－－7.00

7.38－－2.00－－8.00

7.73－－1.00－－9.00

8.04－－0.50－－9.50

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一般免疫组化用PBS只包含Na2HPO412H2O（磷酸氢二钠）

NaH2PO42H2O（磷酸二氢钠）Nacl

用于细胞培养的PBS需含有氯化钾

称取8NaCl、0.2KCl、1.44Na2HPO4和0.24KH2PO4,溶于800ml

蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L

即可0.01M

PBS缓冲液

称取NaCl8，KCl0.2，Na2HPO412H2O3.63g,KH2PO40.24，

溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温

保存备用。

PBS是最普遍过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是我的总结：

母液的配制：

0.2MNa2HPO4：称取71.6gNa2HPO4-12H2O，溶于1000ml水

0.2MNaH2PO4：称取31.2gNaH2PO4-2H2O，溶于1000ml水

各种浓PB(pH=7.4)的配制：

先配0.2MPB(pH=7.4，100ml)：取19ml0.2mol/L

的NaH2PO4，81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。

然后只需将0.2MPB(pH=7.4)按相应比适当稀释即可，如：

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0.1MPB（PH=7.4）：取500ml0.2MPB，加水稀释至1000ml即可。

0.01MPB（PH=7.4）：取50ml0.2MPB，加水稀释至1000ml即可。

0.02MPB（PH=7.4）：取100ml0.2MPB，加水稀释至1000ml即

可。

需要NaCL的话，加入NaCL至0.9%（g/100ml）即可。

另：其它各种另PH值的0.2MPB（100ml)配方：

pH0.2MNaH2PO4（ml）0.2MNa2HPO4（ml）

5.793.56.5

5.8928

5.99010

6.087.7