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- 2025-04-01 发布于四川
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第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体
课标内容要求
核心素养对接
1.阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段,使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
2.概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。
1.生命观念:运用结构与功能观,理解动物细胞融合的原理和过程。
2.科学思维:结合详细实例,以流程图的形式表示单克隆抗体的制备过程。
3.社会责任:说明单克隆抗体的特点及应用。
一、动物细胞融合技术
1.概念
使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
2.诱导原理和结果
(1)诱导原理:细胞膜的流淌性。
(2)诱导结果:形成杂交细胞。
3.诱导方法:PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。
4.意义:突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。
5.动物细胞融合技术的应用
(1)成为探讨细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
(2)用于制备单克隆抗体。
二、单克隆抗体及其应用
1.制备原理
(1)B淋巴细胞的特点:一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,B淋巴细胞在体外不能(填“能”或“不能”)无限增殖。
(2)骨髓瘤细胞的特点:能无限增殖。
(3)杂交瘤细胞的特点:既能大量增殖,又能产生特异性抗体。
2.制备过程
基于单克隆抗体制备的过程,完成下列问题。
(1)A操作注射特定的抗原,目的是可以从小鼠的脾中得到产生特定抗体的B淋巴细胞。
(2)杂交瘤细胞技术选择融合的两种细胞:细胞①多种B淋巴细胞,细胞②骨髓瘤细胞。
(3)过程B和C为诱导细胞融合的过程,获得的细胞③是多种(填“一种”或“多种”)。
(4)细胞③到细胞④的过程运用特定的选择培育基进行筛选,只有细胞④杂交瘤细胞才能生长,其他细胞不能生长。
(5)细胞⑤来源于细胞④(填数字序号),细胞⑤为抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞,其分泌的抗体能与特定的抗原结合。
(6)培育杂交瘤细胞的方法是注射到小鼠腹腔和D体外培育,从培育液或小鼠腹水中可提取⑥单克隆抗体。
3.应用
(1)诊断试剂。如:利用同位素或荧光标记的单克隆抗体,定位诊断肿瘤、心血管畸形。
(2)治疗疾病。
推断对错(正确的打“√”,错误的打“×”)
1.动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核的融合。 (√)
2.与植物原生质体融合相比,动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒。 (×)
提示:动物细胞融合特有的诱导因素为灭活的病毒。
3.用特定的抗原对小鼠进行免疫后,从小鼠脾脏中只能得到一种B淋巴细胞。 (×)
提示:免疫后的小鼠从脾脏中获得的是多种B淋巴细胞。
4.单克隆抗体是单个B淋巴细胞增殖并产生的抗体。 (×)
提示:单克隆抗体是杂交瘤细胞产生的抗体。
5.单克隆抗体制备过程中的两次筛选目的相同。 (×)
提示:第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞,而其次次筛选是为了获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
动物细胞融合
1.融合的原理与过程
(1)原理:细胞膜的流淌性。
(2)过程:动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。其中细胞膜融合是细胞融合的先导,在细胞膜融合中体现出细胞膜具有肯定的流淌性,细胞融合的实质是核融合。动物细胞融合完成的标记是两个或多个细胞核融合为一个细胞核。如下图(以灭活的病毒诱导为例):
2.融合的结果
形成单核杂交细胞,具有原来两个或多个细胞的遗传信息,可表现出两个或多个亲本的特点。
3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较
项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
细胞融合原理
细胞膜的流淌性、细胞的全能性
细胞膜的流淌性
细胞融合方法
用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合
用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使组织分散成单个细胞后,诱导细胞融合
诱导
手段
①物理法:电融合法、离心法等;②化学法:PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法等
①物理、化学法:与植物体细胞杂交的相同;②生物法:灭活病毒诱导法
结果
获得杂种植株
获得杂种细胞,以生产细胞产品
用途
培育植物新品种
制备单克隆抗体、病毒疫苗、干扰素等
1.什么是灭活?灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么?
提示:灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染实力,但是并不破坏这些病原体的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞相互凝合,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。
2.动物细胞融合与植物原生质体融合的原理相同吗?
提示:相同,都依据细胞膜的流淌性。
1.下图表示用仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程,下列相关叙述正确的是()
A.细胞A和细胞B必需为同种细胞才能融合
B.细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质
C.该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性
D.植物细
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