分子生物学(余爱丽)第八章prok基因表达调控.pptVIP

PN蛋白的作用导致PL和PR控制的迟早期基因的表达表达产物CⅢ蛋白、CⅡ蛋白、O蛋白、P蛋白、Q蛋白PQ蛋白的作用导致PR’控制的晚期基因的表达表达产物头尾蛋白、溶菌酶蛋白巧妙的调控，小区段表达，整合到寄主染色体上1此外，CⅡ促进Pint启动子转录，使intgene表达产生2整合酶3CⅢ、CⅡ蛋白共同确立PE处CⅠ的转录（左向）4PE(EstablismentPromoter)5CⅠ阻遏与裂解生长有关基因的转录，其中转录出的6CⅠmRNA含有S-D序列，因此有很高的翻译活性71、溶源化的建立－－PE启动子的转录（二）溶源途径Pint启动子N蛋白抗终止CⅢ、CⅡ蛋白被转录N蛋白和Cro蛋白被转录CⅡ作用于PE(PRE)转录CⅠ左向转录阻遏蛋白结合于OROLCⅠ导致自身从PRM处转录4、阻遏蛋白与操作子的相互作用（硝酸纤维素膜结合试验）IPTGLacOCIR序列以+11为对称轴两边为两段各6bp的重复序列＋11+5到+17之间大部分在左侧－5＋21操作子的结构LacRepressor=tetramerLacOpreon的正调控－－CAP-cAMP复合物cAMPCAP蛋白cAMPLowglucose=highcAMP总结lacoperontranscription-controlregion正控制：CAPprotein负控制：repressor第三节TrpOperon及弱化作用机理一、结构?结构基因?末端---终止子trpt’(依赖ρ)、trpt(不依赖ρ)邻氨基苯甲酸合成酶吲哚甘油磷酸合成酶Trp合成酶?相距很远的trpR编码阻遏蛋白其活性形式为四聚体,并且只有结合trp时才有活性?trpO与trpE之间的162bp的前导区可转录到mRNA中?控制区域:P、O和前导区及弱化子?trpO的结构*trpP有正常的－35和－10区，－10区完全在trpO内*位于trpP内，20bp,有完美的IR序列阻遏调控机制无trp时有trp时无活性010302弱化作用控制-----基因转录的翻译调控通过核糖体对前导区的翻译而对转录进行调控发现－－－缺失增加结构基因的表达，且与阻遏蛋白无关无trp时，所有RNApol都能通过弱化子弱化子（attenuator):TrpOperon中trpE前的一段非结构基因的对应序列（123－150），其中包括不依赖ρ因子的终止子，由于翻译的作用使转录终止，这段序列称为…(衰减子)弱化子调控的表现：（与阻遏蛋白的负调控结果类似）有trp时，部分逃过阻遏蛋白监督的RNApol在弱化子处大部分被扣留，而只有10％能通过1、TrpOperonmRNA的前导序列结构?下游---14aa的前导肽的ORF，其中两个相连的trp的codonUGG(60位)对弱化作用的实现起重要作用?下游长28bp的不依赖ρ因子的终止子为弱化子的核心部分?前面有核糖体结合位点（S－D序列）2、前导序列的二级结构决定RNApol在弱化子处是终止转录还是继续转录1和2、3和4配对★序列1和2、3和4配对时，RNApol在3、4区的不依赖ρ因子的终止子处终止,其后的trpE等基因表达受到限制（翻译作用不存在时或顺利进行）2和3配对★序列2和3配对时，RNApol继续转录，使前导序列后的结构基因得以转录3、弱化子弱化控制的机制Prok.无核膜，转录和翻译偶联（1）细胞缺少trp，Trp-tRNATrp水平低，核糖体停顿在两个邻近的Trp密码子处，此时核糖体占据序列1，此时序列4还没转录出来，序列2和3有机会配对，RNApol可通过弱化子(3)此外,Arg饥饿时有相同的后果(2)当细胞有Trp时,Trp-tRNATrp水平很高,核糖体顺利地翻译出前导肽而在终止密码子处(+70,UGA位于序列1和2之间)解离,此时,核糖体占据了序列1和部分序列2,使序列2不能有效地和序列3配对,因而序列3和4产生终止子发夹结构,转录终止?实现弱化子对转录的调控关键是时间和空间上的巧妙安排空间上：两个Trp的codon位置至关重要时间上：核糖体停顿在两个Trp