茅版第七章损伤与修复.ppt

2、紫外線引起的DNA損傷DNA在紫外線照射下，DNA鏈內相鄰的嘧啶以共價鍵連成二聚體，相鄰的兩個T、或兩個C、或C與T間都可以環丁基環（cyclobutanering）連成二聚體，其中最容易形成的是TT二聚體。紫外線照射還能引起DNA鏈斷裂等損傷。結構扭曲鏈內堿基交聯、烷基化、堿基丟失或鏈斷裂等因素可引起DNA雙鏈結構的扭曲改變；結果將阻止複製和轉錄；紫外交聯作用：紫外照射引起兩鄰接胸腺嘧啶間形成嘧啶二聚體，造成雙螺旋扭曲。3、電離輻射引起的DNA損傷電離輻射損傷DNA的效應直接效應：DNA直接吸收射線能量而受到損傷；間接效應：DNA周圍其他分子（主要是水分子）吸收射線能量產生具有高反應活性的自由基而損傷DNA。電離輻射可導致DNA分子的多種變化堿基變化主要是由OH-自由基引起，包括堿基氧化修飾、過氧化物的形成、堿基環的破壞和脫落等。一般嘧啶比嘌呤更敏感。去氧核糖變化去氧核糖上的每個碳原子和羥基上的氫都能與OH-反應，導致去氧核糖分解，最後引起DNA鏈斷裂。DNA鏈斷裂去氧核糖破壞或磷酸二酯鍵斷開而致DNA鏈斷裂是嚴重損傷事件，斷鏈數隨照射劑量而增加；DNA雙鏈中一條鏈斷裂稱單鏈斷裂，DNA雙鏈在同一處或相近處斷裂稱為雙鏈斷裂；單斷發生頻率為雙斷的10-20倍，但較易修復；單倍體細胞（如細菌）一次雙斷就是致死事件。交聯DNA鏈交聯：同一條DNA鏈上或兩條DNA鏈上的堿基間可以共價鍵結合。DNA-蛋白質交聯：DNA與蛋白質之間以共價鍵相連，組蛋白、染色質中非組蛋白、調控蛋白、與複製和轉錄有關的酶都會與DNA共價鍵連接。交聯是細胞受電離輻射後在顯微鏡下看到的染色體畸變的分子基礎，影響細胞功能和DNA複製。1、化學誘變劑1）烷化劑：如甲烷磺酸乙酯（MMS）等烷基化修飾核苷酸產生聚化加合物2）可導致堿基類似物產生的化學試劑，如HNO2胞嘧啶脫氨基變成尿嘧啶，造成G?C→A?T轉換腺嘌呤脫氨基變成鳥嘌呤類似物次黃嘌呤，A?T→G?C3）嵌入劑：如EB等產生插入突變和缺失突變（三）化學因素引起的DNA損傷2、烷化劑對DNA的損傷1）烷化劑：一類親電子化合物，易與生物大分子親核位點發生反應。2）烷化劑的兩種類型單功能基烷化劑，即只能使一個位點烷基化，如甲基甲烷碘酸；雙功能基烷化劑，可同時使兩處烷基化，如化學武器氮芥、硫芥等，一些抗癌藥物如環磷醯胺、苯丁酸氮芥、絲裂黴素等，某些致癌物如二乙基亞硝胺等；3）烷化劑作用的損傷堿基烷基化DNA鏈中嘌呤或嘧啶的N或O上添加烷基，其中鳥嘌呤的N7和腺嘌呤的N3最容易受攻擊；烷基化的嘌呤碱基配对会发生变化，例如鸟嘌呤N7被烷化後就不再與胞嘧啶配對、而改與胸腺嘧啶配對，結果會使G-C轉變成A-T。堿基脫落烷化鳥嘌呤糖苷鍵不穩定，易脫落形成DNA上無堿基的位點，複製時可以插入任何核苷酸，造成序列的改變。斷鏈DNA鏈的磷酸二酯鍵上的氧易被烷化，形成不穩定的磷酸三酯鍵，易在糖與磷酸間發生水解，使DNA鏈斷裂。交聯雙功能基烷化劑兩個功能基可同時使兩處烷基化，結果造成DNA鏈內、DNA鏈間、以及DNA與蛋白質間的交聯。堿基類似物結構與正常堿基相似，進入細胞能替代正常堿基摻入到DNA鏈而干擾DNA複製；5-BU結構與胸腺嘧啶十分相近，在酮式結構時與A配對，卻又更容易成為烯醇式結構與G配對，在DNA複製時導致A-T轉換為G-C。常見的堿基類似物如5-溴尿嘧啶（5-BU）、5-氟尿嘧啶（5-FU）、2-氨基腺嘌呤（2-AP）等可用作促突變劑或抗癌藥物。3、堿基類似物對DNA的損傷4、修飾劑對DNA的損傷有些化學物質能專一修飾DNA鏈上的堿基；亞硝酸鹽能使C脫氨變成U，經過複製就可使DNA上的G-C變成A-T對；羥胺能使T變成C，結果是A-T改成C-G對；黃麯黴素B也能專一攻擊DNA上的堿基導致序列的變化。（四）損傷的後果——突變1、突變：指染色體DNA堿基水準上的永久的、可遺傳的改變；2、突變的種類點突變（pointmutation）DNA上單一堿基的變異。嘌呤替代嘌呤（A與G之間的相互替代）、嘧啶替代嘧啶（C與T之間的替代）稱為轉換（transition）；嘌呤變嘧啶或嘧啶變嘌呤則稱為顛換（transvertion）。缺失（deletion）指DNA鏈上一個或一段核苷酸的消失。插入（insertion）指一個或一段核苷酸插入到DNA鏈中。在為蛋白質編碼的序列中如缺失及插入的核苷酸數不是3的整倍數，則發生讀框移動（read