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突变型:白眼(w)实验一
果蝇的性状观察和饲养管理目的和要求了解果蝇的生活习惯,掌握果蝇饲养管理的方法,学习鉴定果蝇的雌雄性别和某些遗传性状。0102果蝇(fruitfly,vinegarfly),广泛存在于全球温带及热带气候区,且由于其主食为腐烂水果,在人类的栖息地如果园、菜市场等地皆可见其踪迹。目前已发现1000多种果蝇,果蝇以酵母菌为主要食料,能发酵的水果或植物基质,都可用作果蝇的饲料。二、预备知识黑腹果蝇(Drosophila):双翅目,果蝇属。特点:生活史短,每12天左右即可完成一个世代;饲养容易,以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖;繁殖能力强,每只受精的雌蝇可以产卵500个左右;突变型多,突变性状多,多数是形态变异,容易观察;染色体少、个体小,是一种很好的遗传学实验材料,是一种模式生物。Morgan(1866-1945)1908年,遗传学家摩尔根把它带上了遗传学研究的历史舞台,约在此后30年的时间中,果蝇成为经典遗传学的“主角”。摩尔根提出了基因在染色体上直线排列以及连锁交换定律,并于1933年被授予诺贝尔奖。1946年,摩尔根的学生,被誉为“果蝇的突变大师”的米勒,证明X射线能使果蝇的突变率提高150倍,因而成为诺贝尔奖获得者。在近代发育生物学研究领域中,果蝇的发生遗传学独领风骚。1995年,诺贝尔奖再次授予三位在果蝇研究中辛勤耕耘的科学家。0102果蝇的生活史卵2.一龄幼虫3.二龄幼虫三龄幼虫5.蛹6.成虫25℃时,从卵至成蝇需10天左右。010304020506果蝇是完全变态昆虫,生活周期可分为4个时期:卵、幼虫、蛹和成虫。最适培养温度20~25℃,温度越高,生长越快,但高于30℃不育甚至死亡。卵:白色,椭圆形,长约0.5mm,前端背面伸出一触丝,附着在食物上。幼虫:一龄——二龄——三龄,三龄体长4-5mm,幼虫头尖尾钝,头上有一黑色钩状口器。蛹:化蛹前三龄幼虫停止摄食,爬到相对干燥的瓶壁上,形成菱形的蛹,形状由淡黄、柔软逐渐硬化为深褐色。成虫:刚羽化的果蝇虫体较肥大,体表呈半透明,颜色逐渐加深,硬化。01野生型果蝇及几种常见的突变型果蝇。三、实验材料02培养箱、镊子、搪瓷杯、电炉、高压灭菌器、培养瓶、棉花塞、烧杯、玻棒、滤纸、酒精棉球、解剖镜、毛笔、麻醉瓶、白瓷板。乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖。四、实验器具和药品试剂(20ml/管)。待稍冷后加入酵母粉和丙酸,充分调匀、分装04溶液中,煮沸。取剩余的水将玉米粉调成糊状边搅拌边加入到琼脂糖03电磁炉上加热溶解,再加入蔗糖煮沸。按配方称取培养基各组分。先取一半水加入琼脂于02内,以121℃,1.5大气压消毒15分钟,冷却备用。清洁指管,盖上适当大小的棉塞,置高压灭菌锅01果蝇培养基配制果蝇培养基配方玉米粉11.2克蔗糖8.9克干燥酵母粉1克琼脂1克水100毫升添加0.8ml丙酸作为防腐剂果蝇操作方法搬移果蝇至新培养瓶或麻醉瓶取新培养瓶一瓶,将棉塞略为松动,放置于右手侧,取欲转移之果蝇培养瓶置于左手侧,以左手握住瓶颈,两指轻扣棉塞顶部,以右手轻拍瓶底使果蝇掉落于培养基表面,将培养瓶置于左手侧,拔起棉塞以左手两指夹住棉塞外端,再将置于右手侧之新培养瓶棉塞拔起,以右手两指夹住棉塞外端,再以右手将新培养瓶倒扣于旧培养瓶上,再以左手握住两瓶口相接处,翻转使新培养瓶位于下方,然后以右手掌心轻拍新培养瓶瓶底,使果蝇掉落于新培养瓶瓶底,然后迅速盖上各瓶棉塞。果蝇可用乙醚麻醉,以方便实验操作。取一麻醉瓶,瓶口应与培养瓶大小相仿,使两瓶口相对,培养瓶在上,用手拍击培养瓶,使果蝇落入麻醉瓶内,迅速盖上棉塞,滴加3滴乙醚于小管口中的棉花上,约一分钟左右果蝇倒卧于瓶底,即可将果蝇倒出进行操作。麻醉方法:注意:过度麻醉将导致果蝇死亡。如果果蝇的翅膀与身体呈45度角翘起,表明麻醉过度,不能复苏。果蝇操作方法取白瓷板平置于桌面,将麻醉的果蝇倒于白瓷板上,解剖镜或低倍显微镜下进行性状观察,并将雌雄果蝇分开放置。果蝇观察、计数接种观察过的果蝇(2-3对)到新配置的培养瓶中,为避免麻醉的果蝇直接掉落于培养基表面而粘着于培养基表面致死,先将培养瓶横放,将麻醉的果蝇用毛笔转移到瓶壁,待其苏醒后再将培养瓶正立。010203果蝇操作方法再麻醉观察或计数过程中,果蝇可能苏醒,可准备一玻璃培养皿,内以胶带贴一小块棉球,滴入适量乙醚,培养皿口朝下置于一旁备用,如见果蝇翻身走动可将培养皿口朝下,盖于果蝇上
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