细胞化学染色检验.ppt

二甲基联苯胺法：过氧化氢新生态氧过氧化物酶二氨基联苯胺不溶性沉淀第31页，共43页，星期日，2025年，2月5日关于细胞化学染色检验第1页，共43页，星期日，2025年，2月5日细胞学和化学结合的一门科学。以细胞形态学为基础，结合运用化学反应原理对细胞内的各种化学物质（包括酶类、脂类、糖类、铁、蛋白质、核算等）作定性、定位、半定量分析的方法。第2页，共43页，星期日，2025年，2月5日临床应用辅助判断急性白血病的临床类型。根据细胞化学染色结果不同，可推断细胞所属系列。辅助血液系统疾病的诊断和鉴别诊断。由于血细胞在病理情况下，其化学成分及含量发生变化，可以辅助疾病的诊断，如中性粒细胞碱性磷酸酶染色、铁染色等。第3页，共43页，星期日，2025年，2月5日细胞染色的基本步骤固定为了保持细胞结构和化学成分的不变，需要对细胞进行固定。分为物理法和化学法物理法：干燥和火焰固定化学法：蒸气固定和液体固定，如甲醛、乙醇、甲醇、丙酮。第4页，共43页，星期日，2025年，2月5日有色沉淀反应通过不同化学反应，是被检测物质最终形成稳定的有色沉淀。1）偶氮偶联法：含苯酚的底物，在相应酶的作用下释放出萘酚，萘酚与重氮盐结合，偶氮偶联形成相应颜色的沉淀物。2）普鲁士蓝反应：细胞内、外的铁与酸性亚铁氰化钾作用，形成如亚铁氰化钾蓝色沉淀。第5页，共43页，星期日，2025年，2月5日3）雪夫反应：过碘酸氧化细胞内糖类中的乙二醇基形成乙二醛基，醛基与雪夫试剂作用，使无色品红形成红色沉淀物。第6页，共43页，星期日，2025年，2月5日复染目的在于使各种细胞能显示出来便于辨认。选择复染液的颜色应与有色沉淀的颜色有明显对比度既能使细胞结构显示又能清楚的看出细胞化学染色的结果。第7页，共43页，星期日，2025年，2月5日铁染色ferricstain第8页，共43页，星期日，2025年，2月5日原理健康人骨髓中的铁主要存在于骨髓小粒和幼红细胞中。骨髓中的铁在酸性环境下与亚铁氰化钾作用，形成普鲁士蓝色的亚铁氢化铁沉淀，定位于含铁部位。第9页，共43页，星期日，2025年，2月5日化学反应铁+亚铁氰化钾亚铁氰化铁酸性环境蓝色沉淀第10页，共43页，星期日，2025年，2月5日细胞外铁主要存在于骨髓小粒的巨噬细胞内，反映体内贮存铁。分-、+、++、+++、++++五个等级。第11页，共43页，星期日，2025年，2月5日细胞内铁存在于中幼红细胞、晚幼红细胞、及红细胞中的铁（包括铁粒幼红细胞、铁粒红细胞）。油镜下计数100个中幼红和晚幼红细胞，记录胞浆中含有蓝色颗粒细胞的百分数。第12页，共43页，星期日，2025年，2月5日铁粒幼细胞根据蓝色铁颗粒多少粗细分为：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型。环形铁粒幼细胞：胞质内蓝色颗粒5颗以上，围绕核周三分之一以上。铁粒红细胞：红细胞内出现铁颗粒。第13页，共43页，星期日，2025年，2月5日参考范围细胞外铁：+~++细胞内铁：铁粒幼细胞阳性率在12%~44%。Ⅰ型为主，少数Ⅱ型。无环形铁粒幼及铁粒红细胞。第14页，共43页，星期日，2025年，2月5日临床意义缺铁性贫血：细胞外铁阴性，细胞内铁阳性率下降或为零。经铁剂治疗后，其细胞内、外铁增多，因此铁染色可作为诊断缺铁性贫血及指导铁剂治疗的重要方法。第15页，共43页，星期日，2025年，2月5日铁粒幼细胞贫血：铁粒幼红细胞增多，有时可见到铁粒红细胞，细胞外铁也常增多。因此铁染色可作为诊断本病的重要方法。第16页，共43页，星期日，2025年，2月5日骨髓增生异常综合征：伴环形铁粒幼红细胞增多，其环形铁粒幼细胞大于有核细胞15%,细胞外铁也常增多。第17页，共43页，星期日，2025年，2月5日非缺铁性贫血：溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、再生障碍性贫血、多次输血后和白血病等，细胞外铁和内铁正常或增加。感染、肝硬化、慢性肾炎、尿毒症、血色病等细胞外铁明显增加而铁粒幼细胞减少。第18页，共43页，星期日，2025年，2月5日应用评价临床上应用最广泛的