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新型有机荧光探针之合成、性质与生物传感改善

第一章前言

1.1引言

荧光生物分析技术是利用荧光探针研究生物间相互作用，分析生物

结构与作用过程的重要技术。有机荧光探针是荧光传感技术和光学成像技

术的重要信号工具，这能使人类通过肉眼直接观察到生物分子水平上的作

用并且提供工具观察到复杂的生物结构和进程。一般来说用作生物分析的

荧光探针要求高选择性和高灵敏度。选择性一般是基于特别的识别单元和

受体的相互作用。而灵敏性主要是通过探针的荧光亮度和分析物结合前后

的荧光差异来实现[1]。传统有机荧光探针的光发射是容易发生淬灭的，

这是因为高浓度的探针在聚集状态下容易淬灭，影响了探针的响应灵敏

度。这是生物荧光传感中不愿意见到的现象，这也是科学家想极力避免的

聚集诱导淬灭现象（aggregation-causedquenching，ACQ现象）[1-7]。

即使无机荧光材料如无机量子点也存在着ACQ现象[8]。为了避免ACQ

效应，科学家不得不使用浓度非常低的探针来进行生物分析应用，导致了

探针灵敏度下降并使痕量分析生物分子遇到障碍[2]。即使在稀浓度下，

ACQ效应也有可能存在，因为生物有机探针会趋于聚集在生物分子的表面

或者在生物分子的疏水腔形成团簇，也增加了探针在局部范围的浓度。总

之，许多传统探针在生物传感时无法避免地发生不灵敏的“Turn-off”模

式，这种模式大大限制了探针的实际应用。当溶液中水含量增加时，其荧

光强度下降。当水含量超过70%时，荧光基本消失。这种ACQ现象的产

生是因为DDPD含有一种类似光盘状的中心平面分子-二萘嵌苯，当DDPD

聚集时，该平面分子发生π-π堆积形成激基缔合物，导致了ACQ效

应。ACQ效应在传统的分子中很容易被观测到，在两亲性远红外/近红外

辐射（FR/NIR）荧光团中经常能观测到ACQ效应，因为这种荧光团一般

含有疏水的容易聚集的芳香环。研究发现主要有以下两种因素导致有机发

光分子因聚集产生荧光淬灭：1.分子间的电子振动作用引发固态或聚集态

的有机分子非辐射耗散能量；2.有机分子具有平面π共轭结构，分子间

相互作用生成的激基缔合物阻碍荧光发射。科学家开发了一系列方法来解

决以上问题，如通过物理方法调控分子结构等方法来限制分子间的聚集。

虽然有不错的效果，但是制备合成方法的复杂和加工流程的繁琐性大大限

制了这些荧光材料的实际应用[10-13]。

………

1.2典型AIE特征的有机分子

1.2.1硅杂环戊二烯(Silole)

自2001年Tang发现第一个AIE分子MPPS开始，接下来一系列

MPPS分子及其衍生物都被设计发现出来[29]。目前研究地较为完善的

AIE体系是基于Silole的衍生物体系。图1.2和图1.3所示为

Silole衍生物[2,30-44]的小分子、大分子及其聚合物结构，它们均具

有AIE性能。它们有AIE效应是由于在单分子状态下，其结构为非平面

构型，边缘苯环和中心环丁烯硅烷有着一定角度，苯环结构能围绕单键自

由旋转，从而产生能量耗散。但其在固态及聚集态时中，由于分子内苯环

的旋转受限，荧光强度增加。例如，化合物2(hexaphenylsilole,or

HPS)不溶于水，微溶于甲醇，溶于三氯甲烷、四氢呋喃和乙腈。其乙腈

溶液在光激发下基本没有任何荧光发射，但是当乙腈-水混合溶液的水含

量超过50%时，其分子间发生聚集而使荧光增强，当乙腈-水混合溶液中

水含量达到99%时，分子大量聚集，荧光强度相对于在纯乙腈溶液条件下

提高了255倍。这说明silole分子为典型的AIE分子。

……….

第二章9,10-二苯乙烯基蒽季铵盐生物探针合成及核酸适体传感

2.1引言

核酸适体（aptamer）是一段经体外筛选技术—指数富集配体系统进

化（SELEX）筛选出的具有特定功能的寡聚核苷酸片段，通常为单链DNA

（ssDNA）或RNA。核酸适体能特异结合蛋白质或其他小分子物质，可以

有效的结合相应的配体，表现出如抗体一样的高度的识别能力和亲和力。

因其分子量小、制备过程简单、稳定性好、特异性强等优点，被认为是生

物传感器中理想的分子识别元件[1,2]。由于核酸适体只是一段化学合成

的DNA或RNA片段，并不具有信号转换和显示的功能，而将其用于识别