DB34T1032-2009 饲料中林可霉素的测定-高效液相色谱法.pdf

DB34

安徽省地方标准

DB34/T1032—2009

饲料中林可霉素的测定-高效液相色谱法

2009-10-21发布2009-10-21实施

安徽省质量技术监督局发布

DB34/T1032—2009

前言

本标准的附录A为资料性附录。

本标准由安徽省畜牧兽医局提出。

本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所(安徽省畜产品质量安全检测中心)。

本标准起草人：明文庆、许世富、刘发全、丁在亮、汤春莲、陈文帮、张莉、刘红云、蔡东东。

本标准首次发布。

DB34/T1032—2009

饲料中林可霉素的测定-高效液相色谱法

1范围

本标准规定了饲料中林可霉素的测定--高效液相色谱法。

本标准适用于饲料中林可霉素的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的

修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T14699.1饲料采样方法

3试样的制备

按GB/T14699.1采样，选取有代表性的饲料样品至少500ｇ，四分法缩减至100ｇ，经粉碎，全

部过1ｍｍ孔筛，混匀装入磨口瓶中备用。

4方法原理

试样中的林可霉素加入超纯水超声提取30min，过滤。滤液再过0.45μm的滤膜，以乙腈-水-

三乙胺(10∶90∶0.3，磷酸调pH值至3.5)为流动相，流速为1mL／min，波长214nm。用高效

液相色谱仪(带紫外检测器)测定。

5试剂与材料

5.1除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为去离子水，符合GB/T6682二级水的规定。

5.2林可霉素对照品纯度≥98.0%。

5.3乙腈(色谱纯)。

5.4三乙胺。

5.5林可霉素标准贮备液（0.5mg/mL）：准确称取25mg林可霉素对照品，用超纯水溶解并稀释至

50mL量瓶中，贮存于0℃～8℃冰箱中，有效期30d。

5.6林可霉素标准工作液：分别吸取林可霉素标准贮备液0.02mL、0.04mL、0.1mL、0.2mL、1mL、

2mL于10mL棕色容量瓶中，用超纯水定容，标准工作液系列浓度分别为1μg/mL、2μg/mL、5μ

g/mL、10μg/mL、50μg/mL、100μg/mL，4℃保存，有效期7d。

6仪器与设备

6.1分析天平，感量0.00001g和感量0.01g。

6.2超声波发生器。

6.3高效液相色谱仪(配紫外检测器)。

6.4涡旋混合器。

6.5饲料粉碎机。

6.6振荡摇床。

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7分析步骤

7.1试样提取

称取样品10±0.05g，加入50mL超纯水超声提取30min，过滤。滤液再过0.45μm的滤

膜，滤液上HPLC分析。

7.2色谱条件

色谱柱：C18(5μm，4.6×150mm)；

检测波长：214nm；

流动相：乙腈-水-三乙胺(10∶90∶0.3)，磷酸调pH值至3.5；

流速：1.0mL/min；

进样体积：20μL。

7.3定