动物实验基本操作.docVIP

动物实验基本操作

一、实验动物的抓取与固定。

（一）小鼠。

1.抓取。

-用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部将其提起，放在鼠笼盖或其他粗糙表面上。当小鼠向前挣扎时，用左手的拇指和食指迅速捏住小鼠两耳后颈背部皮肤，无名指和小指夹住小鼠尾巴根部，将小鼠固定成头部略向上的姿势。

-原因：捏住尾巴提起小鼠可以避免小鼠咬伤操作人员，将其放在粗糙表面上是利用小鼠的本能反应（向前挣扎），便于后续准确抓取其颈背部皮肤。而固定成头部略向上的姿势有利于进行诸如灌胃、注射等操作，并且能防止小鼠咬伤操作人员脸部等部位。

2.固定。

-如需进一步固定，可将小鼠放在特制的小鼠固定器内，将其身体和四肢固定好。也可以将小鼠固定在泡沫板上，用大头针固定其四肢（这种方法常用于解剖实验）。

-原因：使用固定器可以确保小鼠在实验过程中保持稳定，减少因挣扎而影响实验操作的准确性，同时也能保障操作人员的安全。对于解剖实验，在泡沫板上用大头针固定四肢可以充分暴露小鼠的身体结构，便于进行精细的解剖操作。

（二）大鼠。

1.抓取。

-先用右手抓住大鼠尾巴中部，将大鼠提起，放在粗糙平面上。然后用左手戴防护手套（大鼠体型较大且可能会激烈挣扎，容易咬伤操作人员），从大鼠背部绕到其胸前，拇指和食指捏住大鼠两耳后颈背部皮肤，其余手指握住大鼠身体，将其提起固定。

-原因：与小鼠抓取类似，先抓住尾巴提起是为了初步控制大鼠，放在粗糙平面上利用其向前挣扎的本能便于后续抓取。戴防护手套是因为大鼠的咬合力较强，为了防止操作人员受伤。

2.固定。

-可将大鼠放入大鼠固定器中固定。对于需要进行手术等操作的大鼠，也可将其麻醉后固定在手术台上，用绑带固定其四肢。

-原因：固定器和手术台固定都能保证大鼠在实验过程中保持稳定，使实验操作能够顺利进行，尤其是在进行需要精细操作的手术时，稳定的固定是确保手术成功的关键因素之一。

二、实验动物的给药操作。

（一）口服给药。

1.灌胃法（以小鼠为例）

-准备好灌胃针（一般为特制的金属针具）和相应的药物溶液。将小鼠固定好，头部略向上。把灌胃针从小鼠口腔插入，沿着上腭后壁轻轻推进，通过食管进入胃内（一般插入深度约为小鼠体长的1/3-1/2）。然后将药物缓慢注入胃内，注药完毕后，缓慢拔出灌胃针。

-原因：固定头部略向上的姿势有助于灌胃针顺利插入食管而不是误入气管。准确掌握灌胃针的插入深度是为了确保药物能准确进入胃内，如果插入过浅可能导致药物反流或误注入食管以外的部位，插入过深则可能损伤胃壁或肠道。

2.混饲法。

-将药物均匀混合在饲料中，让实验动物自由采食。这种方法适用于药物对动物食欲影响不大且需要长期给药的情况。

-原因：混饲法操作相对简单，不需要对动物进行特殊的操作（如灌胃等可能引起动物应激的操作）。但是，其缺点是难以准确控制每只动物的给药量，因为动物的采食量可能存在差异。

（二）注射给药。

1.皮下注射（以小鼠为例）

-选择小鼠背部或颈部皮肤松弛的部位。将小鼠固定，用酒精棉球消毒注射部位。然后用注射器（一般使用1ml注射器，针头为25-27G）将针头斜刺入皮下，回抽无回血后，缓慢注入药物。

-原因：选择皮肤松弛部位便于针头刺入皮下组织。消毒是为了防止感染。回抽无回血是为了确保针头不在血管内，如果在血管内注射可能会导致药物快速进入血液循环，引起不良反应或影响实验结果，因为皮下注射是将药物缓慢吸收进入血液循环的给药方式。

2.肌肉注射（以大鼠为例）

-通常选择大鼠的大腿外侧肌肉丰厚的部位。固定大鼠后，消毒注射部位。将针头垂直刺入肌肉，回抽无回血后注入药物。

-原因：大腿外侧肌肉丰厚，能够容纳一定量的药物，并且肌肉组织的血液供应丰富，有利于药物的吸收。垂直刺入肌肉可以确保药物准确注入肌肉组织内，回抽无回血也是为了避免药物注入血管。

3.腹腔注射（以小鼠为例）

-固定小鼠，使其腹部朝上。消毒腹部中线偏左或偏右的部位（避免损伤腹部脏器）。将注射器针头与腹部呈一定角度（约30-45度）刺入腹腔，回抽无回血或无肠内容物后注入药物。

-原因：腹部中线偏左或偏右注射是为了避开腹部的主要脏器，防止刺伤脏器。回抽检查是为了确保针头不在血管或肠道内，因为腹腔内有多种器官和血管，如果药物注入血管或肠道会影响实验结果并可能对动物造成伤害。

三、实验动物的采血操作。

（一）小鼠尾尖采血。

1.操作方法。

-将小鼠固定，露出尾巴。用酒精棉球擦拭尾巴末端使其充血，然后用消毒后的剪刀或刀片剪去尾尖（约1-2mm），让血液自然滴入采血管中。采血完毕后，用棉球压迫止血。

-原因：擦拭尾巴末端使其充血是为了增加局部血流量，便于采血。剪去尾尖采血是一种相对简单且对小鼠损伤较小的方法，适用于采血量较少（一般为几十微升到几百微升）的情况。压迫