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专题10生物技术工程
••本节导航——••
模板01酶切位点的选择-既要相同要不同
模板02双标记筛选金标准一二去其一是为真
明.答题模板签题要点+签题技巧+模板延用
佐•高分突破棋板综令分绻,快速技巧哭破
’〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃
命题点真题在线常见设问/关键词
微生物的选
2023-山东・T152023•广东・T102023•北京・T162022-全国甲・T37
择培养和计
2022•全国5372022•广东・T212021•江苏・T18
数
2023•广东・T122023•江苏・T132023•浙江1月选考・T242021•福
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2020-北京・T132020-山东・T13
2023-北京・T12
动物细胞融
2023-湖北・T222022-山东・T152022•福
合和单克隆设问关键词:限制酶
建・T13
抗体的制备的选择、目的基因的
2021-山东・T152021•江苏・T112020•全国I・T38
鉴定、PCR过程
基因工程的
2023•全国乙・T382023•全国甲・T382023•湖北・T42023•广东・T20
基本操作程
2021•广东・T22
序
DNA片段的
2023•江苏・T222023•山东・T252023•浙江6月选考・T192022•辽
扩增与电泳
宁・T122022•江苏・T242021-山东・T252021-全国甲・T38
鉴定
几种不同2023•江苏・T222023-山东・T252022•江苏・T242022-山东・T25
PCR的应用2021-全国甲.T382021-山东.T252020-北京・T122020.江苏.T33
命题预测基因表达载体的构建;标记基因的选择
目的基因和载体的酶切和连接是设计的核心;根据题目的具体信息判断保留和破坏的标记基
关键技巧
因的类型
/〃〃〃/〃〃/〃〃/〃〃/〃〃/〃〃/〃〃/〃〃/〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃,
模板01酶切位点的选择■既要相同又要不同
8答题要点
【核心】相同黏性末端,正确连接方向
酶切位点的选择实际上有许多需要考虑的逻辑,但核心点是两个:
要保证质粒和目的基因的黏性末端相同,才能让质粒和目的基因的黏性末端相互连接。
要保证基因的头对着启动子,尾对着终止子,才能保证正确的转录。
除这两个原则之外,很多题目还会有额外的信息,如基因中间或质粒其他位置存在相同酶切位点、同尾酶
等,要根据题目信息具体判断。
【基本知识】
(1)限制性内切核酸酶(简称〃限制酶〃)
王要来源同切+初
>原核生物
塑J分离的限制酶有数千种
特点识别双链DNA分子的特定核吾酸序列,
(专芫j使每一条链中特定部位的磷酸二酯键
限断开
制一
色」断开两个核昔酸之间的磷酸二酯键
酶
「切割位置:识别序列的中心轴线两侧
•pRTIJ
号Z一5ZGAA:TTC3ZGAATTC
黏在(在G与:一
A之间3,CTT:AAG5CTTAAG
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