高效液相色谱分析法HPLC.ppt

抑制器的工作原理(阳离子)H2OH2OH++O2H2OH2+OH-H2O废液/气体废液H2OSO42-Y+X-H+MSA-(样品e,淋洗液）OH-OH-MSA-SO42-X-OH-MSA-SO42-X-H+MSA-,O2H2O,H2H++OH-Y++OH-H+至检测器H2OY+OH-X-:样品中的阴离子Y+:样品中的阳离子电极（＋）电极（－）阴离子交换膜阴离子交换膜纯水或来自检测器的液体第55页，共78页，星期日，2025年，2月5日微膜抑制器的优缺点优点：可以连续再生交换容量高死体积小（50?L以下）缺点：基体物质和溶剂对膜可能带来损害工作曲线线性范围受离子交换膜的影响第56页，共78页，星期日，2025年，2月5日新型连续自动再生柱抑制器三根高容量、长寿命和易操作的微填充抑制柱。一根在流路工作一根用硫酸再生一根用水冲洗第57页，共78页，星期日，2025年，2月5日离子色谱的应用例:阴离子分析双柱；薄壳型阴离子交换树脂分离柱(3×250mm),流动相：0.003mol·L-1NaHCO3/0.0024mol·L-1Na2CO3，流量138mL/hr七种阴离子在20分钟内基本上得到完全分离，各组分含量在3～50ppm第58页，共78页，星期日，2025年，2月5日5.液相色谱检测器a.紫外检测器检测原理：和UV-Vis方法一样应用最广：HPLC分析中，约80%的物质可以在254或280nm处产生紫外吸收采用微量吸收池，通常其光程为2-10mm,体积约为1-10?L特点：灵敏度高线形范围大波长可选，易于操作对流动相的流速和温度变化不敏感可用于梯度洗脱石英窗接色谱柱UV光电倍增管废液第23页，共78页，星期日，2025年，2月5日光电二极管阵列检测器紫外检测器的重要进展光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，可分别同时检测特定波长(180-600nm)10ms内完成一次检测计算机快速处理三维立体谱图第24页，共78页，星期日，2025年，2月5日快速扫描—光电二极管阵列（PDA）检测所获得的三维色谱-光谱图波长可的松氟美松皮质酮第25页，共78页，星期日，2025年，2月5日b.示差折光检测器（differentialrefractiveindexdetector）原理：通过连续测定参比池和测量池中溶液的折射率之差，来测定样品的浓度特点：通用型检测器（除紫外检测器之外应用最多的检测器）对温度敏感、不能用于梯度洗脱灵敏度低（10-7g/mL）偏转式、反射式和干涉型三种干涉式折光指数检测器造价高用的较少第26页，共78页，星期日，2025年，2月5日偏转式：利用两束相同角度的光照射溶剂相和样品+溶剂相，利用二者对光的折射率不同，其中一束（通常是通过样品+溶剂相）光因为发生偏转造成两束光的强度差发生变化，将此差示信号放大并记录，该信号代表与样品的浓度呈正比流通池体积大（10?L）可用于各种溶剂折射率的测定反射式折光指数检测器通过测定经流动相折射后反射光的强度变化，来测定组分的含量流通池体积小（3?L）用于不同溶剂折射率的测定时需更换流通池1.31-1.44和1.40-1.60第27页，共78页，星期日，2025年，2月5日c.荧光检测器（Fluorescencedetector）原理：许多有机化合物，特别是芳香族化合物、生化物质，被一定强度和波长的紫外光照射后，发射出较激发光波长要长的荧光特点：高灵敏度、高选择性所需样品量很小应用：多环芳烃，维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等对部分不产生荧光的物质，可先衍生化在测定第28页，共78页，星期日，2025年，2月5日d）电导检测器原理：基于待测物在一些介质中电离后所产生的电导（电阻的倒数）变化来测量电离物质的含量电导检测器的构成：由电导池、测量电导率所需的电子线路、变换灵敏度的装置和数字显示仪等几部分组成，电导池是其核心。响应受温度影响较大，因此需要将电导池置于恒温箱中不能用于梯度洗脱当pH7时，该检测器不够灵敏电导检测器主要用于离子色谱的检测溶液至检测池电极检测池