注射用水微生物限度检查方法验证.docx

注射用水微生物限度检查方法

验证方案

文件编码：

项

项

目

姓 名

签 名

日 期

起

草

审

核

审

核

批

准

生效日期

年 份

注射用水微生物限度检查方法验证名目

1、注射用水微生物限度检查方法验证打算

2、注射用水微生物限度检查方法验证小组

3、注射用水微生物限度检查方法验证方案

4、注射用水微生物限度检查方法验证培训记录

5、注射用水微生物限度检查方法验证附属记录

6、注射用水微生物限度检查方法验证报告

7、注射用水微生物限度检查方法验证合格证书

注射用水微生物限度检查方法验证打算

依据我公司认证领导小组的要求及验证委员会的安排，对注射用水微生物限度检查方法进展验证，具体安排如下：

一、年月日—年月日，制定验证方案，由注射用水微生物限度检查方法验证小组组长负责起草。

二、年月日—年月日，验证方案争论、修改、审批和培训。三、年月日—年月日，验证工作实施。

四、年月日—年月日，依据验证状况与记录，书写验证报告。五、年月日—年月日，验证报告审核批准，合格证发放。

注射用水微生物限度检查方法验证小组

组 长：

成 员：

一、目的

《中华人民共和国药典》2025版二部规定注射用水微生物限度检查承受薄膜过滤法，确认该方法适合于本公司注射用水中细菌、霉菌及酵母菌数测定。

二、适用围

本公司注射用水中细菌、霉菌及酵母菌的测定。

三、容

概述

当建立微生物限度检查法时，应进展细菌、霉菌及酵母菌的计数方法验证，已确认所承受的方法适合于该产品的细菌、霉菌及酵母菌的测定。假设产品的组分或原检验条件发生转变可能影响检验结果时，计数方法应重验证。

验证工程及认可标准

对各试验菌的回收率逐一进展验证，试验组的菌回收率不得低于70%〔试验组的平均菌落数减去供试品比照组的平均菌落数的值占菌液组的平均菌落数的百分率〕。

验证依据

《中华人民共和国药典》2025版二部附录XIJ微生物限度检查法。

验证方法与容

验证方法承受薄膜过滤法进展细菌、霉菌及酵母菌的测定。

验证试验分3组，至少应进展3次独立的平行试验，并分别计算供试品组和比照组试验的菌回收率。

仪器设备

TMQ.R-3870型台式灭菌器

HPX-9272MBE型电热恒温培育箱(30～35℃)

单人净化工作台

4.3.4.MJ-160霉菌培育箱(23～28℃)

培育基

养分肉汤培育基

养分琼脂培育基

玫瑰红钠琼脂培育基

酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培育基

改进马丁培育基

验证过程与方法

取样：由质量部生测室检验人员负责取样。用灭菌好的锥形瓶取注射用水〔注A-0、注A-7、注B-8、注B-0〕取样点水样各1500ml,马上送质量部生测室检验。

菌液制备

取经35～36℃培育18~24小时的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、与枯草芽孢杆菌养分肉汤颖培育物1ml参加到9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至10-6~10-7约50~100cfu∕ml的菌悬液备用。

取经24～25℃培育24~48小时的白色念珠菌改进马丁液体培育物1ml参加到9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至10-5约为50~100cfu∕ml的菌悬液备用。

取经24～25℃培育一周的黑曲霉菌斜面培育物，加3~5ml含0.05%〔ml∕ml〕聚山梨脂80的0.9%无菌氯化钠溶液将孢子洗脱，然后吸出孢子悬液，用垫有脱脂棉的漏斗

〔湿热灭菌〕过滤，除去菌丝，收集孢子悬液至另一无菌试管作为菌原液，取此孢子悬液1ml加到9ml含0.05%〔ml∕ml〕聚山梨脂80的0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至10-5约为50~100cfu∕ml的菌悬液备用。

菌液计数〔每种菌液至少接种2个平皿〕

取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌与枯草芽孢杆菌各1ml分别接种至养分琼脂培育基，置30～35℃培育48小时计数；

取白色念珠菌、黑曲霉各1ml分别接种至玖瑰红钠琼脂培育基，置23～28℃培育72小时计数；

取白色念珠菌1ml接种至酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培育基置23～28℃培育72小时计数。

计数结果见验证记录

验证方法

试验组 取注射用水100ml和50～100cfu试验菌，过滤，取出滤膜，菌面朝上贴于琼脂培育基平板上培育。每株试验菌平行制备2个平皿，按薄膜过滤法测定其菌数，每片滤膜上的菌落数应不超过100cfu。

菌液组 取50～100cfu试验菌，分别注入平皿中，马上倾注琼脂培育基，每株试验菌平行制备2个平皿，按平皿菌落计数法测定其菌数。

供试品比照组取注射用水100ml，过滤，取出滤膜，菌面朝上贴于琼脂培育基平板上培育。同法，细菌、霉菌及酵母菌各制备2个平皿，测定供试品