动物细胞融合及其应用课件高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

第2节第二课时

动物细胞融合技术与

单克隆抗体;

1.阐明动物细胞融合技术的概念，举例说出诱导动物细胞融合的方法。

2.概述单克隆抗体的制备过程。;

1.概念：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。

2.原理：细胞膜的流动性

3.融合方法：PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。

4.意义：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。已成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段，特别是杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。

灭活病毒诱导细胞融合的原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与

细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。;

动物细胞融合技术

植物体细胞杂交技术

高Ca2+—高pH融合法等

脱分化再分化移栽

A细胞A原生质体

正在融合的

原生质体杂种细胞愈伤组织杂种植株

移栽后的植株

B细胞B原生质体;;

提问比较：

比较动物细胞融合技术和植物体细胞杂交技术

(1)原理不同：动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性;植物体细胞杂

交技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性

(2)诱导方法不同：两者都可用聚乙二醇(PEG)融合法和电融合法诱导融合；但动物细胞还可用灭活病毒诱导法诱导细胞融合。

(3)最终结果不同：动物细胞融合最终得到的是杂交细胞，而植物体细胞

杂交技术最终得到的是杂种植株;

1.如图表示仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程，下列

叙述正确的是

仙台病毒0

细胞a细胞b细胞c;

2.对比动物细胞融合和植物体细胞杂交技术，下列论述正确的是

A.均可使用PEG、电融合或灭活病毒诱导细胞融合

B.两者都可以跨越种属间的生殖隔离

C.两者都可以体现细胞的全能性

D.在适宜的条件下，均可产生完整个体;

单克隆抗体及其应用

1.传统抗体的获得

(1)方法：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。

(2)缺陷：产量低、纯度低、特异性。

2.单克隆抗体的制备

(1)大量制??单一抗体的思路

一个B淋巴细胞只分

泌一种特异性抗体

动物细胞融合动物细胞培养

骨髓瘤细胞(癌细

胞)能无限增殖;

(2)存在的问题：B淋巴细胞不可能无限增殖。

(3)解决方案：;

=单克隆抗体及其应用

用特定的抗原对小鼠进

行免疫，并从该小鼠的

脾中得到能产生特定抗

体的B淋巴细胞

注射特定的抗原培养骨髓瘤细胞;

多种B

淋巴

细胞

诱导

融合

骨髓瘤

细胞;

目的是能从该小鼠的脾中得到可以产生特定抗体的B淋巴细胞。

(2)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经诱导融合后，培养基中共出现几种细胞?其

中融合的细胞有几种?(若融合的话，只考虑两两融合);

(3)单克隆抗体制备过程中，第一次筛选的目的是什么?方法是什么?

目的筛选出杂交瘤细胞；方法：用特定的选择培养基进行筛选

(4)单克隆抗体制备过程中，第二次筛选的目的、方法及其原理是什么?;

3.单克隆抗体的优点

(1)能准确地识别抗原的细微差异。

(2)可以与特定抗原发生特异性结合。

(3)可以大量制备。

4.单克隆抗体的应用;

单克隆抗体及其应用

使用高效的细胞毒素类药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞。但细胞毒素没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害，这限制了它在临床上的应用。抗

体—药物偶联物(antibody-drugconjugate,ADC)通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、

接头和药物(如细胞毒素)三部分组成，它的作用机制如下图所示。;

课堂练习

甲状旁腺激素(PTH)水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH,有关制备过程的叙述不正确的是

A.需要使用动物细胞培养技术

B.需要制备用PTH免疫的小鼠

C.利用抗原-抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞

D筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞;

课堂练习

科学家将能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体与药物结合，制成了抗体一药物偶

联物(ADC),实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。下列叙述错误的是

A.ADC由抗体、接头和ADC被细胞吞噬

抗体⑤

药物三部分组成药物

B.ADC可与肿瘤细胞表接头