细胞化学染色PPT课件.ppt

A图：急性单核细胞白血病α-NAE染色原始、幼稚单核细胞多呈强阳性B图：急性单核细胞白血病α-NAE氟化钠抑制染色原始、幼稚单核细胞阳性反应被氟化钠抑制（与A图为同一标本）AB*【原理】血细胞内的α-NBE在pH碱性条件下，水解基质液中的α-丁酸萘酚，释放出α-萘酚，进而与基质液中的重氮盐偶联形成不溶性的有色沉淀，定位于细胞质内酶所在的部位。（三）α-丁酸萘酚酯酶（α-NBE）染色*【正常血细胞的染色反应】1.粒细胞系统各阶段粒细胞呈阴性。2.单核细胞系统分化差的原始单核细胞呈阴性，分化好的原始单核细胞呈阳性，幼稚单核及单核细胞呈阳性，阳性反应能被氟化钠抑制。3.淋巴细胞系统T淋巴细胞、非T非B淋巴细胞可呈阳性，B淋巴细胞呈阴性。4.其他细胞巨核细胞、有核红细胞、浆细胞呈阴性或弱阳性；组织细胞也可呈阳性，但不被氟化钠抑制。（三）α-丁酸萘酚酯酶（α-NBE）染色*【临床意义】与α-NAE染色的临床意义相同。（三）α-丁酸萘酚酯酶（α-NBE）染色*【原理】血细胞中的酸性α-醋酸萘酚酯酶在pH弱酸性(pH5.8)条件下，可水解基质液中的α-醋酸萘酚，产生α-萘酚，进而与重氮盐六偶氮付品红形成不溶性红色沉淀，定位于细胞质内酶所在的部位。（四）酸性α-醋酸萘酚酯酶（ANAE）染色*【正常血细胞的染色反应】1.单核细胞系统单核系细胞常呈弥散型强阳性，阳性反应可被氟化钠抑制。2.淋巴细胞系统T淋巴细胞呈阳性，而B淋巴细胞多数呈阴性。3.其他细胞粒系细胞一般为阴性或弱阳性，但此反应不被氟化钠抑制；红系细胞、巨核系细胞含量较少。（四）酸性α-醋酸萘酚酯酶（ANAE）染色*【临床意义】1.可粗略地鉴别T、B淋巴细胞2.鉴别其它急性白血病细胞类型同α-NAE染色。3.多发性骨髓瘤、多毛细胞白血病细胞多为阳性；恶性组织细胞病呈强阳性；霍奇金淋巴瘤网状高铁红细胞(R-S细胞)呈阳性。（四）酸性α-醋酸萘酚酯酶（ANAE）染色*M3M1、M2aM5ALLPOX染色强阳性阳性或阴性阴性或弱阳性阴性SB染色强阳性阳性或阴性阴性或弱阳性阴性NAS-DCE染色强阳性阳性或阴性阴性或弱阳性阴性α-NAE染色强阳性阴性或阳性阳性或强阳性阴性或阳性α-NAE+NaF不抑制不抑制抑制不抑制α-NBE染色阴性阴性阳性阴性α-NBE染色+NaF//抑制/PAS染色阳性（弥散状）阳性（弥散状）阳性（细颗粒状）阳性（粗颗粒状）四种常见类型急性白血病的染色结果*常用细胞化学染色与急性白血病亚型诊断思路*前面我们介绍的骨髓片，在不染色的情况下，细胞颜色非常的浅，我们肉眼不能辨别，所以我们先要进行瑞氏染色。但瑞氏染色？只是细胞染色，而不是细胞化学染色。细胞化学染色是在细胞形态完整的前提下，对特定的成分，如蛋白，进行精确的定性、定位及半定量。引申：染组织中的特定成分——组织化学染色；用免疫的方法（用到Ab）染染组织中的特定成分——免疫组织化学染色。意义：有些细胞形态非常相似，或是变异之后与其他细胞较难鉴别，可用所含的特定成分，进行细胞的鉴别。例如。。。看名称，基本知道？所染对象，所有细胞均有吗？并不是。本节课重点介绍前六种，即除铁染色之外的染色原理及临床意义。临床意义为重点。临床一定级别才开展，检验师考试，考点很多。加以重视。过碘酸是氧化剂，能使含有乙二醇基（-CHOH-CHOH）的多糖类物质（糖原、粘多糖、粘蛋白、糖蛋白及糖酯等）氧化，形成双醛基（-CHO-CHO），醛基与雪夫试剂中的无色品红结合，使无色的品红变成紫红色化合物，定位于含有多糖类的细胞内。1、粒：（+）嗜酸（浆）（+）、嗜碱（颗粒）（+）；单核：弱（+）。2、红：呈（-）；淋巴系：成熟（+）3、巨核细胞：呈强（+）。临床ACP染色应用较少，主要用于多毛细胞白血病的诊断及脂质代谢障碍性疾病的鉴别。3.T淋巴细胞ACP呈阳性反应，颗粒粗大、密集、局限性块状阳性；B淋巴细胞ACP呈阴性反应或颗粒稀疏、细小的弱阳性反应。p71项目三细胞化学染色*细