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第2章细胞工程第2节动物细胞工程第3课时动物体细胞核移植技术和克隆动物
“(悟空)拔一把毫毛,丢在口中嚼碎,望空喷去,叫一声‘变!’,即变作三二百个小猴,周围攒簇(cù)。”这是《西游记》中的一段描述,展示了中华先贤的想象力。毫毛来自体细胞,我们能用体细胞“变”出一群猴吗?2017年,我国科学院神经科学研究所孙强团队将这一幕变成了现实,他们利用体细胞核移植技术成功克隆出两只猕猴“中中”和“华华”。
01一、体细胞核移植技术1.概念:将动物一个细胞的细胞核,移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。为何不称为“克隆技术”而是“核移植技术”?
401一、体细胞核移植技术4.种类:胚胎细胞核移植:体细胞核移植:细胞分化程度低,表现全能性容易细胞分化程度高,表现全能性十分困难3.生殖方式:无性生殖难度小难度大2.原理:动物细胞核的全能性
501一、体细胞核移植技术①供体细胞的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其____前的功能状态,这导致了_____________;胚胎发育率低②对非人灵长类动物_____进行操作的技术尚不完善。胚胎分化5.非人灵长类动物体细胞核移植的困难原因具有许多与人类相似的生物学特征的灵长类动物2017年我国培育世界上首例体细胞克隆猴1996年首个体细胞克隆动物多莉羊诞生以来,之后科学家成功克隆了多种大型家畜,但直到2017年才完成非人灵长类动物的克隆!
如何得到单个的供体体细胞?活动一:构建动物体细胞核移植的技术路线卵母细胞从哪里来?需要在体外培养到什么时期?采集牛卵巢中的卵母细胞,在体外培养到MⅡ期在供体细胞的细胞核移入卵母细胞前,需要先对卵母细胞进行什么操作?为什么?从什么性状牛的身上取供体细胞?从高产奶牛上取体细胞动物细胞培养做供体细胞显微操作去核诱导融合的方法?融合的结果?将供体细胞注入去核卵母细胞(透明带内),电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞,形成重构胚。二、体细胞核移植的过程
活动一:构建动物体细胞核移植的技术路线激活重构胚的方法是什么?用这些方法处理重构胚的目的是什么?激活重构胚的目的:使其完成细胞分裂和发育进程早期胚胎用物理或化学方法:(如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂)有了早期胚胎,怎样才能发育成为一头真正的小牛呢?将胚胎移入(受体)代孕母牛生出的小牛长得像那一头牛呢?生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛(克隆牛)
801【思考讨论】体积大、营养多、容易操作;营养物质丰富,为发育提供充足营养含有促使细胞核表达全能性的物质高产奶牛(供体)因为10代以内的细胞保证了供体细胞正常的遗传基础。为何选用MⅡ卵母细胞?问一般选用10代以内的细胞,为什么?问采集卵母细胞,体外培养至MⅡ期二、体细胞核移植的过程
901通过显微操作去核梯度离心紫外光短时间照射化学物质处理使DNA变性失活,达到去核的目的。没有刺破卵母细胞膜,对卵母细胞伤害小。纺锤体——染色体复合物卵母细胞去核的原因是什么?方法是什么?问为使核移植动物的核遗传物质全部来自供体的细胞;并防止细胞染色体的数量发生变化方法:显微操作法二、体细胞核移植的过程
1001将供体细胞注射入去核的卵母细胞将供体细胞整个注入去核卵母细胞中的原因?问对卵母细胞损伤较小;保证供体细胞的细胞核不被破坏,操作方便。二、体细胞核移植的过程
1101重构胚克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么?问克隆动物遗传物质细胞核的DNA来自于供体动物的细胞核线粒体中的DNA供体细胞和卵母细胞生活环境:性状可能发生基因突变、染色体变异等可遗传变异出生与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛二、体细胞核移植的过程
1201早期胚胎培养动物细胞培养胚胎移植动物细胞融合重构胚早期胚胎通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞用物理或化学方法激活重构胚,使其完成细胞分裂和发育过程将胚胎移入受体(代孕)母牛体内采集牛卵巢中的卵母细胞,在体外培养到MⅡ期去核的卵母细胞供体细胞培养将供体细胞注入去核的卵母细胞通过显微操作去核高产奶牛(供体)从供体身体的某一部位(如耳)上取体细胞生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛该过程中应用到了哪些技术?动物细胞核移植动物细胞培养动物细胞融合早期胚胎培养胚胎移植动物体细胞的细胞核具有全能性问该技术证明了什么?问二、体细胞核移植的过程
练习与应用1.(2021·湖北武汉质检)2017年11月27日,世界上首例体细胞克隆猴“中中”诞生;12月5日,第二例克隆猴“华华”诞生。我国科学家攻克了与人类相近的灵长类动物猕猴的体细胞克隆的难题。获得克隆猴的流程如图所示,据图回答问题:
(1)“中中”“华华”的性状与__
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