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选择性必修三《生物技术与工程》;;
温故而知新
杂种植物;;
一、动物细胞融合技术
(二)问题:
1、什么是病毒的灭活?
灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力,但是并不破坏
病毒的抗原结构。;;
》》一、动物细胞融合技术
思考:19世纪30年代,科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人
的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象?;
》》一、动物细胞融合技术
(三)灭活病毒诱导细胞融合过程:;
不能无限增殖产生大量抗体
缺点:制备的抗体一般为多克隆抗体,产量低、纯度低,特异性差;
二、单克隆抗体技术及其应用
1、科学家发现:1)体内产生的特异性抗体种类多达百万种以上
2)每个B淋巴细胞只分泌一种特异性的抗体
如何获得大量、单一的抗体?
2、需解决问题:一个B淋巴细胞细胞群抗体
单克隆抗体
3、遗憾:体外培养时,一个B淋巴细胞不能无限增殖
如何解决这一难题?;
1:我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的
癌细胞
2:有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和无限增殖能力同时具备
动物细胞融合;
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体
骨髓瘤细胞(癌细胞)能无限增殖;
》》二、单克隆抗体及其应用
2、单克隆抗体的制备过程
用抗原注射小鼠;
多种杂交
瘤细胞
2
杂交瘤细胞;
若杂交瘤细胞混合培养,得到的是
能与特定抗原结合的多种抗体。
此处将杂交瘤细胞进行有限稀释,
虽然接种到细胞培养板上,每个培养孔只有一个杂交瘤细胞,这样每个孔培养得到的抗体就是单抗。;
一冬
分离、提纯单克隆抗体;
项目;;
》二、单克隆抗体及其应用
知识拓展:第一次筛选获得杂交瘤细胞
①细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基蝶呤阻断。
②人B淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但不能分裂增殖。
③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径,没有S途径,但能不断分裂增殖。
如果D途径被阻断,它会因不能合成DNA而死。;
将杂交瘤细胞群稀释,约每孔1
个细胞进行培养(克隆化培养)
一段时间后,检测各孔上清液中细胞分泌的???体
上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔
分泌抗体能跟特定抗原结合的细胞即为所需杂交瘤细胞;
项目;
资料1用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”,在妊娠第8天就可以作出诊断,这比原来的诊断方法提前了10d左右,可以避免孕妇在不知道妊娠的情况下因服用药物而对胎儿造成不利影响。该方法检测的准确率在90%以上。;
二、单克隆抗体技术及其应用
思考讨论
资料2使用高效的细胞毒素类药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞。但细胞毒素没
有特异性,在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害,这限制了它在临床上的
应用。抗体一药物偶联物(antibody-drugconjugate,ADC)通过将细胞毒素与能
特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合,实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物(如细胞毒素)三部分组成,它的作用机制如下图所示。;
可用放射性同位素标记单克隆抗体进行靶向放疗。一些作用于
细胞信号转导通路的药物可以通过阻断肿瘤细胞的信号通路来抑制其生长,理论上也可以将这些药物与单克隆抗体结合进行治疗。;
二、单克隆抗体技术及其应用
讨论3.单克隆抗体诊断试剂盒和ADC在临床上各具有什么优势?
单克隆抗体诊断试剂盒中的抗体只与特定的抗原反应,故特异
性和灵敏度提高,生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可以传代培养、冷
冻保存和复苏利用,利于控制质量和标准化生产。
ADC能够协同发挥抗体特异性识别的靶向作用和细胞毒素对肿
瘤细胞的杀伤作用,因此它在临床上具有靶点清楚、毒副作用小等
优点。;
比原来诊断方法提前了10d左右,
准确率在90%以上。
诊断优点:
具有准确、高效、简易、快速特点;
》》二、单克隆抗体及其应用
乙肝测定试剂
艾滋病检测试剂;
》二、单克隆抗体及其应用
2、用于治疗疾病和运载药物
主要用于癌症治疗。如:单克隆抗体+药物=“生物导弹”
(“生物导弹”—单抗导向,药物为弹头);
1.动物细胞融合的概念、结果、原理、意义是什么2.动物细胞融合常用的方法,
3.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较
1.单克隆抗体制备的研究背景
2.单克隆抗体制备
1.诊断试剂
2.运载药物
3.治疗疾病
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