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主题4关注生物科学技术的前沿发展

考向1生物科学技术在农业生产中的应用

1.实验小组用核辐射消除某烟草细胞的细胞核,获得保留细胞质(含叶绿体)且具有链霉素抗性的烟草细胞甲,用酶去除烟草细胞甲和无链霉素抗性的烟草细胞乙的细胞壁,然后将二者的原生质体置于培养基上融合,获得杂种细胞丙。下列有关该过程的叙述,错误的是(B)

A.为了筛选出融合的杂种细胞,应在培养基中加入链霉素

B.去核的烟草细胞甲能在含链霉素的培养基上进行增殖

C.融合形成的杂种细胞丙同时具有烟草细胞甲和乙的遗传物质

D.杂种细胞的形成体现了细胞膜的流动性

2.甘蓝型油菜中,抑制PEP基因的表达可提高油菜籽的含油量。通过基因工程将PEP基因反向连接在启动子后,构建转反义PEP基因油菜是提高油菜籽含油量的常用技术路径。请回答下列问题:

(1)为将PEP基因反向连接在启动子后,构建反义PEP基因,需要将限制酶切位点设计在引物上,PEP基因的上游引物和下游引物中应分别引入ScaⅠ、BamHⅠ酶切位点。

(2)用激光照射油菜愈伤组织时,可在细胞膜上打出一个穿孔,转反义PEP基因表达载体由此小孔进入油菜细胞,几秒钟后小孔封闭,该过程体现了细胞膜具有流动性。目的基因表达载体进入细胞后,Ti质粒上的T-DNA区段可转移到油菜细胞的基因组中。

(3)筛选时,需在油菜愈伤组织培养基中加入新霉素进行初步选择。在激光照射下,存活的细胞一般会发出绿色荧光。为检测反义PEP基因是否整合到染色体上,研究者通常检测细胞中是否存在ntp基因,而不检测PEP基因。不直接检测PEP基因的原因是油菜细胞的基因组中本身有PEP基因。

(4)已知PEP基因的转录模板链为A链,则反义PEP基因的转录模板链为B链。转反义PEP基因油菜中PEP基因的表达受阻,原因是以B链为模板转录出的RNA与以A链为模板转录出的RNA配对形成双链,抑制了PEP基因的表达。

3.土地盐渍化严重制约了农业生产,玉米是中度盐敏感植物,耐盐能力比较低,因此限制了玉米的种植面积和产量。科学家旨在分析ABP9基因的高表达与提高植物耐盐性的调控机制的关系,以便改良玉米品种的耐盐性,通过对转基因ABP9玉米植株进行PCR(图1)、核酸杂交和qRT-PCR(又称实时荧光定量PCR)分析鉴定(图2);对转ABP9基因玉米(阳性)及非转基因玉米(阴性对照)进行NaCl胁迫处理(图3),分析二者在幼苗期的生理指标和基因表达差异。回答下列有关问题:

(1)利用特异性引物对转基因ABP9玉米植株进行PCR检测,植株均能扩增出特异性条带,其依据的原理是DNA半保留复制,对实验结果进行分析,结果说明目的基因(基因ABP9)已导入受体细胞;利用qRT-PCR技术检测ABP9基因在转基因及非转基因植株中的表达水平,转基因植株中ABP9基因表达量高于(填“高于”“低于”或“等于”)阴性对照。综上,说明ABP9基因已整合到转基因玉米基因组中,并得到较高水平表达。

(2)观察盐处理3d和7d植株叶片的叶绿素含量,结果显示,与对照组相比,150mmol/LNaCl组叶绿素含量均下降,但转基因植物叶绿素含量高于阴性对照组。

(3)研究表明,玉米叶片中脯氨酸和可溶性糖含量受到胁迫后上升,且转基因植株始终高于阴性对照,由此可见,遭受盐胁迫后转基因植株可以积累更多的有机物质,从而提高自身对高盐胁迫的耐受性。

考向2生物科学技术在免疫学中的应用

4.PC-1基因表达能诱导正常鼠成纤维细胞的恶性转化。在PC-1分子N端(氨基端)有46个氨基酸组成的特异序列,这是许多转录因子激活靶基因转录所具有的共同序列特征;在哺乳动物细胞中验证了PC-1的转录激活作用,通过缺失突变的基因改造,发现该作用存在于该分子N端的46个氨基酸组成的特异序列区域,说明PC-1全长分子极大部分的特异功能均由N端的此区域表达,为制备特异性更高的抗PC-1-46单克隆抗体提供了依据。下列说法正确的是(A)

A.PC-1分子通过激活靶基因转录诱导鼠成纤维细胞的恶性转化

B.扩增PC-1基因只需用此特异性序列所对应的核苷酸序列作引物

C.用哺乳动物细胞转基因的方法验证PC-1的转录激活作用时,必须用受精卵做受体细胞

D.可将PC-1基因导入骨髓瘤细胞制备抗PC-1-46单克隆抗体

5.(多选)免疫学上的嵌合体是指一个动物身上存在两种染色体组成的不同的细胞系,不同细胞系相互嵌合彼此耐受,机体不产生排斥反应。如图表示构建嵌合体小鼠的过程,有关叙述错误的是(B、D)

A.过程③进行前需要对母鼠进行同期发情处理

B.过程②黑白卵裂球混合时,可用电融合法诱导细胞融合

C.从囊胚分离出胚胎干细胞,经诱导后可发育成多种组织

D.嵌合体小鼠的细胞中,可以同时含有白鼠和黑鼠的基因

考向3生物科