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第2章细胞工程
第2节动物细胞工程
第3课时动物体细胞核移植技术和克隆动;
2.原理:动物细胞核的全能性
胚胎细胞核移植细胞分化程度低
3.种类表现全能相对容易
性
体细胞核移植细胞分化程度高
这说明什么?表现全能十分困难
整个细胞随分化程度的提高,分化潜能逐渐减弱,全能性受到限制。;
思考1:为什么体细胞克隆猴的诞生能够轰动世界?有什么困难吗?
原因:日供体细胞的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢
复其分化前的功能状态,这导致了胚胎发育率低;
自对非人灵长类动物胚胎进行操作的技术尚不完善。
⊙自然界的猴繁殖慢,
目自然界的猴基因型不同,会干扰实验结果。
有时用转基因猴进行药物筛选效果更好
思考2:为什么要进行克隆猴的研究?克隆鼠、兔等不能吗?自然界的猴?
研发新药时,进行药物的筛选。
鼠和兔等哺乳动物与人类的亲缘关系比较远,用它们筛选出来的药物对人米的效里不好其至没右作甲;
二、体细胞核移植的过程A母绵羊
从1996年“多莉羊”成功诞生后,短短20年,
人们已成功应用体细胞核移植技术,克隆卵细胞(
了牛、羊、猪和猴等多种哺乳动物。;
思考:
观看视频,与你设计的体细胞核移植过程图对比,
有什么不
同呢?你认为其中
最困难的是什么?;
1、选择卵母细胞作为核移植受体细胞的原因?采集的卵母细胞应培养至什
么时期?
2、卵母细胞去核的方法?“去核”去的是什么?
3、注入去核的卵母细胞的是整个供体细胞还是供体细胞的细胞核?为什么?
4、诱导融合的方法?融合的结果?
5、什么是重构胚?激活重构胚的方法?用这些方法处理重构胚的目的?
6、该过程用到了哪些动物细胞工程的技术手段?;
供体:提供一个细胞的细胞核的动物
去核的卵母细胞
受体:
供体一般选用传代10代以内的细胞,为什么?
当传代至10-50代左右时,部分细胞核型可能会老化或DNA损伤,存在失去分裂能力或癌变风险,而10代以内的细胞一般保持正常的二倍体核型,保证了供体细胞正常的遗传基础。;
目含有激发和促使细胞核全能性表达的物质和
营养条件。
为卵黄多,营养物质丰富。
正常排出的卵子即处于MⅡ期细胞
“去核”去的是什么?实际上是去除纺锤体-染色体复合物
(3)卵母细胞为什么要“去核”?
保证克隆动物的核基因全部来自供
体细胞。;
目前核移植技术中普遍使用的去核方法是
显微操作去核法。
还有人采用梯度离心、紫外光短时间照射、
化学物质处理等方法。这些方法时在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性。;
(4)注入“去核卵母细胞”的是“整个供体细胞’还是“供体细胞的细胞核”?为什么?
直接将供体细胞注入去核卵母细胞的透明带内
原因:日对卵母细胞损伤较小;
目保证供体细胞的细胞核不被
破坏,操作方便。
(5)诱导融合的方法??电融合法
融合的镇体核进入卵细胞,形成重构胚指人工重新构建的胚胎,具
(6)什么是重构胚?有发育成完成个体的能力。
激活重构胚的物理或化学方法
激活重构胚的鞭旗完成细胞分裂和发育进程;
二、体细胞核移植的过程
(7)为了早期胚胎移植能成功,对受体(代孕)动物有何要求?
移植到同种、生理状态相同的其他
雌性动物子宫中。
(8)动物体细胞核移植技术证明了?(原理);
重构胚从供体身上取体细胞
将胚胎移入受体(代孕)母牛体内
生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛
通过电融合法使两细胞融
合,供体核进入卵母细胞;
用物理或化重构胚动物细胞融合
早期胚胎培养学方法激活使其完成细胞分裂和发育
重构胚早期胚胎
胚胎移植
将胚胎移入受体(代孕)母牛体内
体细胞核移植过
生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛程思维导图;
[思考]为何不称为克隆技术”而是核移植技术?
1、克隆动物:用核移植的方法得到的动物
2、克隆技术:◆克隆是指通过无性生殖而产生的遗传上均一的生物群,即具有完全相同的遗传组成的一群细胞或者生物的个体。克隆其实就是复制,可以发生在不同的水平,不同的层次。
◆在生物学上包含分子、细胞、个体3个层次,即分子克隆、细胞克隆、个体克隆。[思考1分子克隆、细胞克隆、个体克隆分别用什么技术?
√分子克隆:单克隆抗体技术、PCR技术(一般指DNA分子扩增)
√细胞克隆:动物细胞培养技术、植物细胞培养技术(由一个细胞分裂所形、成的细胞
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