温故知新:1.培养基的概念、作用和类型分别是什么?2.培养基的基本营养成分、特殊营养成分分别包括什么?3.无菌技术包括消毒和灭菌,消毒的概念、常用的消毒方法分别是什么?灭菌的概念、常用的灭菌方法有哪些?4.酵母菌的纯培养原理、常用的方法、方法步骤分别是什么?5.培养基灭菌方法?倒平板的操作方法?平板划线法的具体操作流程及注意事项?
从社会中来自然界中微生物数量繁多,种类庞杂,要想从中分离出需要的特定微生物并不容易,尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时,仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。稀释涂布平板法呈现的杂菌群该怎么办呢?
第一章发酵工程第二节微生物的培养技术及应用微生物的选择培养和计数(第二课时)学习目标:1.概述培养基的配置方法和微生物纯培养的基本操作要求,进行酵母菌的纯培养2.阐明微生物选择培养的原理3.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
一.选择培养基科学实例:寻找耐高温的DNA聚合酶◆聚合酶链式反应(PCR)是一种在体外扩增DNA片段的技术,此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。◆1973年,布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的水生栖热菌,并从这种菌种提取出耐高温的DNA聚合酶。◆筛选原因:水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存,而绝大多数微生物在此条件下不能生存。
一.选择培养基根据微生物对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。筛选原则耐寒微生物耐热微生物石油分解菌有利于目的菌生长的条件有哪些?营养、温度和pH等
一.选择培养基1.实验室微生物筛选的原理人为提供_________________的条件(包括_____、_____和_____等),同时___________________________。有利于目的菌生长抑制或阻止其他微生物的生长营养温度pH2.选择培养基的概念在微生物学中,将允许生长,同时或其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。特定种类的微生物抑制阻止3.选择培养基的作用使所需微生物成为优势物种,提高筛选率
一.选择培养基4.常见的选择培养基(1)在培养基中加入某种化学物质分离得到酵母菌、霉菌等分离固氮菌分离自养型微生物不加含碳有机物的无碳培养基不加氮源的无氮培养基加入青霉素的培养基分离得到金黄色葡萄球菌加入高浓度食盐的培养基(2)改变培养基中的营养成分(3)改变微生物的培养条件耐高温微生物高温环境下培养厌氧型微生物兼性厌氧型无氧环境下培养
一.选择培养基培养基中加氨苄青霉素培养基原有菌落没有氨苄青霉素抗性的细菌被淘汰怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌?具有氨苄青霉素抗性的菌落没有氨苄青霉素抗性的细菌5.举例
拓展:鉴别培养基1.概念在培养基中加入某种指示剂或化学药品(不影响微生物正常生长),与微生物的代谢产物发生反应,产生明显的特征性变化,从而鉴定出目标微生物2.用途鉴别目标微生物可用伊红美蓝培养基鉴定饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌(若有,则菌落呈黑色)3.举例
思考-讨论选择培养基配方的设计尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质稳定,是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后,会被土壤中的某些细菌分解成NH3,再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶,脲酶催化尿素分解产生NH3,NH3可以作为细菌生长的氮源。讨论:1.如果让你配制一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来,培养基的配方该如何设计?2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点?在选择培养基中,以尿素作为唯一氮源除以尿素作为唯一氮源外,该培养基的其他营养成分与普通培养基基本相同。尿素的分子模型CO(NH2)2+H2OCO2+2NH3脲酶分解尿素的细菌氮源
思考-讨论选择培养基配方的设计尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质稳定,是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后,会被土壤中的某些细菌分解成NH3,再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶,脲酶催化尿素分解产生NH3,NH3可以作为细菌生长的氮源。尿素的分子模型CO(NH2)2+H2OCO2+2NH3脲酶分解尿素的细菌氮源进一步思考:怎么证明一个选择培养基具有选择性呢?应该设置基础培养基(如牛肉膏蛋白胨培养基)或完全培养基作为对照,若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于该选择培养基,则该选择培养基具有选择性。
1.如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素的细菌的过程示
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