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医疗机构环境表面清洁度ATP生物荧光现场评价与检测方法

一、检测原理

ATP生物荧光法基于萤火虫发光原理，即虫荧光素在虫荧光素酶、ATP、氧气、镁离子等参与下发生氧化反应，产生生物光。生物发光程度与样品中的ATP含量成正比。ATP广泛存在于微生物、人体细胞及食物残渣等有机物质中，通过检测环境表面采集样本的ATP含量，可间接反映环境表面的清洁度，提供现场快速检测结果。

二、适用范围

本方法适用于各类医疗机构内的各种环境表面，如桌面、地面、床栏、仪器设备表面等日常清洁消毒效果的现场快速评价与检测。

三、检测前准备

检测设备及耗材

1.ATP荧光检测仪：检测灵敏度需达到能够检测出低至皮克级别的ATP含量，确保检测数据准确可靠。应定期进行校准和质量控制，保证仪器处于良好的工作状态。校准方法依据仪器使用说明书进行，一般使用配套的标准品进行多点校准，确保仪器在设定的检测范围内准确测量。质量控制可采用定期测定已知浓度的质量控制样本，其检测值应在规定的误差范围内。

2.ATP采样拭子：应选用经质量认证的产品，确保对ATP具有高效的采集和释放能力，以保证检测结果的准确性。采样拭子的保存应按照说明书要求进行，通常需在干燥、阴凉的环境下储存，避免高温、潮湿和光照，防止拭子性能受到影响。

3.计时器：用于精确控制采样和检测的时间，确保操作符合标准流程。计时器应具有较高的精度，误差在允许范围内。

4.记录表格及笔：用于记录检测的基本信息，如检测地点、检测时间、样本编号、检测结果等，方便后续数据整理和分析。

采样点选择

1.区域布点：按照随机原则，根据医疗机构不同区域的功能和风险程度，将环境表面划分为高、中、低风险区域。高风险区域如手术室、重症监护室等，需重点关注，采样点应适当增加；中风险区域如普通病房、门诊科室等；低风险区域如行政办公区、走廊等。

2.点的选择：在每个采样区域内，选择有代表性的位置进行采样，一般选择表面经常接触的部位，如病床边缘、床头柜表面、门把手、水龙头开关等；对于面积较大的平面，采用梅花布点法，即采样点均匀分布，呈梅花状排列；对于不规则物体表面，应选择表面关键部位进行采样。

四、检测流程

采样

1.打开ATP采样拭子的包装，将拭子取出，注意避免拭子头部接触其他物体，防止污染。

2.将采样拭子头部完全浸湿于采样溶液中，确保拭子充分湿润，以提高对ATP的吸附能力。

3.用采样拭子在被检测的环境表面进行涂抹采样，涂抹要求：

-对于面积小于100cm2的表面，应全部进行涂抹采样；

-对于面积大于100cm2的表面，需涂抹100cm2的范围，可采用横竖交替的方式进行涂抹，每个方向涂抹5次，确保采样全面。涂抹过程中力度适中，确保拭子充分与表面接触，以采集到足够的样本。

4.采样完成后，将拭子头部放回采样管中，折断拭子杆，使拭子头部完全置于采样管内，确保密封良好。

检测

1.将采样管摇匀，使采样管内的物质充分混合，确保ATP能够均匀分散在溶液中，以保证检测结果的准确性。

2.将采样管放入ATP荧光检测仪中，按照仪器的操作说明进行操作，启动检测程序。检测过程中，仪器会自动测量并记录样品中的ATP含量，检测时间一般为10-15秒。

3.检测完成后，仪器会显示检测结果，检测结果一般以相对光单位（RLU）表示，记录下该数值。

结果判断

根据《医院消毒卫生标准》（GB15982-2012）及医疗机构相关规定，判断环境表面清洁度是否达标。不同风险区域的清洁度标准如下：

-高风险区域：ATP含量应≤100RLU/100cm2；

-中风险区域：ATP含量应≤150RLU/100cm2；

-低风险区域：ATP含量应≤200RLU/100cm2。

当检测结果低于或等于相应区域的限定值时，判定为清洁合格；当检测结果高于限定值时，判定为清洁不合格。

五、质量控制

1.人员培训：对参与检测的人员进行专业培训，培训内容包括检测原理、操作流程、质量控制要求、结果判断标准等，确保检测人员熟练掌握检测技术，严格按照标准流程进行操作，并具备质量保证意识。培训结束后，对检测人员进行考核，考核合格后方可上岗。

2.仪器校准：定期对ATP荧光检测仪进行校准和质量控制，确保仪器的准确性和稳定性。校准和质量控制应按照仪器使用说明书和相关标准要求进行，记录每次校准和质量控制的结果，建立仪器设备档案。

3.对照试验：在每次检测开始前，使用标准ATP样品进行对照试验，验证检测系统的可靠性。对照试验结果应在规定的误差范围内，如超出误差范围，应及时查找原因并进行处理。

4.抽查复样：定期对已检测的样本进行抽查复样，检查检测结果的准