核酸的结构与功能.pptVIP

帽子结构：识别翻译起始polyA：维持mRNA的稳定性功能第62页，共120页，星期日，2025年，2月5日原核生物mRNA为多顺反子，无修饰碱基。多顺反子mRNA(polycistronicmRNA)：一条mRNA链上有多个编码区（2）原核细胞mRNA第63页，共120页，星期日，2025年，2月5日约占全部RNA的80%是核糖核蛋白体的主要组成部分功能与蛋白质生物合成相关。3、rRNARibosomeRNA第64页，共120页，星期日，2025年，2月5日*rRNA的种类（根据沉降系数）真核生物5SrRNA28SrRNA5.8SrRNA18SrRNA原核生物5SrRNA23SrRNA16SrRNA第65页，共120页，星期日，2025年，2月5日所有rRNA分子中都有大量的链内互补序列，可以形成链内碱基配对，使得rRNA高度折叠。rRNA二级结构中存在大量的茎环结构，且对同一沉降系数的不同物种来源的rRNA来说，虽然它们的一级结构同源性不同，但二级结构却非常相似。第66页，共120页，星期日，2025年，2月5日4、其他小RNA及RNA组学非mRNA小RNA（smallnon-messengerRNA,snmRNA)：除了tRNA,mRNA,rRNA外，）在细胞的不同部位还存在着许多其他各类的小分子RNA，通称为snmRNA。RNA组学（RNomics）：研究细胞中snmRNA种类、结构和功能，snmRNA表达谱的变化及其与功能的关系。第67页，共120页，星期日，2025年，2月5日一、核酸的解离与溶解度1、分子量大，两性电解质，通常表现为酸性；2、DNA的pI为4-4.5,RNApI为2-2.5；3、溶解性：均微溶于水；不溶于一般有机溶剂，在70%乙醇中沉淀；4、粘度：DNA粘度大，而RNA粘度小5、DNA对碱稳定，而RNA被稀碱水解。第3节核酸的理化性质第68页，共120页，星期日，2025年，2月5日二、核酸的粘度核酸粘度大小规律：DNARNA双链DNA(dsDNA)单链DNA(SSDNA)第69页，共120页，星期日，2025年，2月5日三、核酸的紫外吸收碱基具有共轭双键，因此具有紫外吸收性质，其吸收高峰接近260nm。DNA紫外吸收光谱：1．天然DNA;2.变性DNA;3．核苷酸中吸收值吸光度波长（nm）第70页，共120页，星期日，2025年，2月5日OD260的应用：1.DNA或RNA的定量OD260=1.0相当于50μg/ml双链DNA40μg/ml单链DNA（或RNA）20μg/ml寡核苷酸2.判断核酸样品的纯度DNA纯品:OD260/OD280=1.8RNA纯品:OD260/OD280=2.0含杂蛋白及苯酚，降低3.判断DNA是否变性在DNA的变性过程中，光吸收值增大（增色效应）在DNA的复性过程中，光吸收值减小（减色效应）第71页，共120页，星期日，2025年，2月5日四、核酸的变性、复性及杂交核酸变性指核酸双螺旋区碱基对间的氢键断裂，空间结构破坏，形成单链无规则线团状态的过程。降解：核苷酸骨架上3’，5’-磷酸二酯键的断裂DNA变性的本质是双链间氢键的断裂1、变性（denaturation）第72页，共120页，星期日，2025年，2月5日核酸变性后，260nm的紫外吸收值明显增加，称增色效应。加热DNA的稀盐溶液，达到一定温度(80～100℃)后，核酸即发生热变性。热变性是核酸的重要性质。热变性DNA缓慢冷却的过程，称退火。核酸变性后，浮力密度增高、粘度降低、生物活性降低或丧失、酸碱滴定曲线改变。第73页，共120页，星期日，2025年，2月5日指增色效应达50%时的温度一般DNATm值在85-90?C之间Tm：DNA变性时，OD260达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度或融解温度(Tm)。大小与G+C含量成正比。第74页，共120页，星期日，2025年，2月5日均一性高，变性的温度范围越窄。Tm值大小与下列因素有关：（1）DNA的均一性：第75页，共120页，星期日，2025年，2月5日测定Tm，可推知G-C含量。G-C%=（Tm